益生菌產(chǎn)品(如酸奶、乳酸菌飲料、益生菌膠囊)的核心質(zhì)量指標(biāo)之一就是活菌數(shù)。準(zhǔn)確測定活菌數(shù),對于產(chǎn)品研發(fā)、過程控制、貨架期研究和標(biāo)簽宣稱驗(yàn)證都至關(guān)重要。而要獲得準(zhǔn)確的活菌計(jì)數(shù)結(jié)果,離不開對檢測方法和培養(yǎng)基的嚴(yán)格質(zhì)控,而質(zhì)控的核心就是標(biāo)準(zhǔn)菌株。益生菌通常包括乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬等,它們的營養(yǎng)需求和培養(yǎng)條件(如厭氧條件、特殊培養(yǎng)基)各不相同。因此,在建立或驗(yàn)證一個(gè)針對特定益生菌產(chǎn)品的計(jì)數(shù)方法時(shí),必須使用該種益生菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株。例如,對于含有嗜酸乳桿菌的產(chǎn)品,在進(jìn)行方法驗(yàn)證時(shí),需要使用嗜酸乳桿菌ATCC 4356作為標(biāo)準(zhǔn)菌株。驗(yàn)證過程通常包括:第一步,制備標(biāo)準(zhǔn)菌株的新鮮菌懸液,并進(jìn)行10倍系列稀釋。第二步,選擇幾個(gè)適宜的稀釋度,分別用待驗(yàn)證的計(jì)數(shù)方法(如傾注法或涂布法)和目標(biāo)培養(yǎng)基(如MRS瓊脂)進(jìn)行培養(yǎng),同時(shí)用參考方法或參考培養(yǎng)基進(jìn)行平行試驗(yàn)。第三步,對所有平板上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)算回收率。如果使用標(biāo)準(zhǔn)菌株在目標(biāo)培養(yǎng)基上的回收率不低于在參考培養(yǎng)基上的回收率(如≥70%),則證明該方法適用于該種益生菌的計(jì)數(shù)。其次,對于雙歧桿菌這類專性厭氧菌,培養(yǎng)條件(如厭氧罐、厭氧工作站)的有效性驗(yàn)證也需要用到標(biāo)準(zhǔn)菌株。在進(jìn)行樣品檢測的同時(shí),將雙歧桿菌ATCC 15697的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種到同樣培養(yǎng)基上,放入?yún)捬跸到y(tǒng)中培養(yǎng)。如果標(biāo)準(zhǔn)菌株生長良好,則證明當(dāng)天的厭氧條件合格,樣品的結(jié)果才可信。第三,在產(chǎn)品貨架期研究中,需要定期監(jiān)測活菌數(shù)的變化。為了確保不同時(shí)間點(diǎn)的檢測結(jié)果具有可比性,每次檢測都應(yīng)使用同一批次的標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽性對照。如果標(biāo)準(zhǔn)菌株的計(jì)數(shù)結(jié)果在各次檢測中保持一致,則證明檢測過程穩(wěn)定,活菌數(shù)的變化真實(shí)反映了產(chǎn)品在儲存過程中的衰減情況。南京樂診提供多種益生菌標(biāo)準(zhǔn)菌株,包括嗜酸乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、動物雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌等,每支菌株都經(jīng)過嚴(yán)格鑒定,可滿足益生菌企業(yè)的研發(fā)和質(zhì)控需求。
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