從4分鐘到10秒！牛頓光學(xué)憑啥讓湖北洪山實(shí)驗(yàn)室效率翻倍？

湖北洪山實(shí)驗(yàn)室

01實(shí)驗(yàn)室介紹

湖北洪山實(shí)驗(yàn)室于2021年2月由湖北省人民政府正式批復(fù)組建，實(shí)驗(yàn)室聚焦生物育種領(lǐng)域，目前匯聚了包括湖北省內(nèi)7個(gè)全國(guó)/國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、7個(gè)國(guó)家自然科學(xué)基金創(chuàng)新研究群體、8位院士在內(nèi)的一批長(zhǎng)江學(xué)者、國(guó)家杰青、優(yōu)青等優(yōu)秀科技人才。湖北洪山實(shí)驗(yàn)室以奉獻(xiàn)對(duì)人類和地球都健康的豐富食物為總體目標(biāo)，圍繞以主要農(nóng)作物、園藝作物、畜禽、水產(chǎn)、微生物等為研究對(duì)象，設(shè)置農(nóng)業(yè)生物種質(zhì)資源保護(hù)與創(chuàng)新、農(nóng)業(yè)生物重要性狀的生物學(xué)基礎(chǔ)、農(nóng)業(yè)生物綠色優(yōu)質(zhì)品種培育、農(nóng)業(yè)綠色生產(chǎn)體系、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)健康五大研究方向。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)

湖北洪山實(shí)驗(yàn)室

02實(shí)驗(yàn)背景

細(xì)胞傳代：細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵操作，旨在讓細(xì)胞持續(xù)生長(zhǎng)繁殖，為科研等提供充足細(xì)胞來(lái)源。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)至 80% - 90% 匯合度時(shí)，需進(jìn)行傳代。

03實(shí)驗(yàn)步驟

（細(xì)胞傳代圖）圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)，若有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除

1.觀察細(xì)胞狀態(tài)：在顯微鏡下觀察培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90%，細(xì)胞形態(tài)飽滿、生長(zhǎng)旺盛，無(wú)明顯污染跡象時(shí)，適宜進(jìn)行傳代。

2.準(zhǔn)備工作：將實(shí)驗(yàn)所需的器材放入超凈工作臺(tái)，用 75% 酒精擦拭消毒。打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈，照射 30 分鐘左右進(jìn)行滅菌。同時(shí)，將培養(yǎng)基、PBS、胰蛋白酶等試劑放入牛頓光學(xué)細(xì)胞復(fù)蘇儀中“無(wú)水加熱”，設(shè)置37度預(yù)熱。

3.棄除舊培養(yǎng)基：在超凈工作臺(tái)內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶蓋，用移液器或移液管小心地吸去培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基，盡量吸凈。

4.洗滌細(xì)胞：向培養(yǎng)瓶中加入適量的 PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，使 PBS 充分沖洗細(xì)胞表面，然后將 PBS 吸出棄去，重復(fù)此步驟 1 - 2 次，以去除細(xì)胞表面殘留的血清和代謝廢物。

5.消化細(xì)胞：向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰蛋白酶溶液，以剛好覆蓋細(xì)胞層為宜。將培養(yǎng)瓶放入 37℃的 CO?培養(yǎng)箱中孵育，消化時(shí)間根據(jù)細(xì)胞類型而定，一般為 1 - 5 分鐘。期間可在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞變圓、細(xì)胞間隙增大且部分細(xì)胞開(kāi)始脫落時(shí)，表明消化適度。

6.終止消化：迅速向培養(yǎng)瓶中加入適量含血清的完全培養(yǎng)基，以終止胰蛋白酶的消化作用。血清中的蛋白質(zhì)可以與胰蛋白酶結(jié)合，使其失去活性。

7.吹打細(xì)胞：用移液器或移液管輕輕吹打細(xì)胞層，使細(xì)胞充分分散成單個(gè)細(xì)胞懸液。吹打時(shí)應(yīng)注意動(dòng)作輕柔，避免產(chǎn)生大量氣泡，以免損傷細(xì)胞。

8.細(xì)胞計(jì)數(shù)：取少量細(xì)胞懸液，用牛頓光學(xué)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，計(jì)算出細(xì)胞濃度及活率，以便確定傳代的細(xì)胞數(shù)量和接種密度。

9.分裝細(xì)胞：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和培養(yǎng)容器的大小，用移液器將適量的細(xì)胞懸液分裝到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。然后向每個(gè)培養(yǎng)容器中加入適量的完全培養(yǎng)基，輕輕搖勻，使細(xì)胞均勻分布。

10.培養(yǎng)細(xì)胞：將分裝好細(xì)胞的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放入 37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度、濕度和氣體環(huán)境能夠?yàn)榧?xì)胞提供適宜的生長(zhǎng)條件。

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04高效精準(zhǔn)的細(xì)胞分析解決方案

牛頓光學(xué)Venus全自動(dòng)高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能通過(guò)高精度成像計(jì)數(shù)以及卓越的算法來(lái)識(shí)別與區(qū)分單個(gè)細(xì)胞以及細(xì)胞團(tuán)簇，與血球計(jì)數(shù)板需4至6分鐘完成單個(gè)樣品分析相比，Venus全自動(dòng)高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)儀僅需不到10秒，即可輕松完成對(duì)1個(gè)樣品的分析，顯著提高了實(shí)驗(yàn)效率。

（湖北洪山實(shí)驗(yàn)室）Venus安裝調(diào)試

牛頓光學(xué)有幸為湖北洪山實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)研究奉獻(xiàn)一份力量。牛頓光學(xué)旨在為廣大科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)、更便捷的實(shí)驗(yàn)方案！

05產(chǎn)品速覽

Venus是牛頓光學(xué)推出的一款全自動(dòng)便攜高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，可以對(duì)各類細(xì)胞進(jìn)行高通量明場(chǎng)、臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)。Venus采用一體化設(shè)計(jì)，配合EasyFive六位細(xì)胞計(jì)數(shù)板，可實(shí)現(xiàn)一步完成6個(gè)樣品、30個(gè)視野的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，時(shí)間僅需1分鐘。獨(dú)特的便攜式設(shè)計(jì)，極大提高了實(shí)驗(yàn)室的空間利用率。