康德學術：四個microRNA聯(lián)合檢測用于早期胰腺癌診斷

胰腺癌是一種惡性程度極高的消化系統(tǒng)腫瘤，五年生存率約10%。胰腺癌發(fā)病率和死亡率近年來明顯上升，位列我國惡性腫瘤死亡率的第7位，全球范圍內(nèi)均呈快速上升趨勢，預計到2030年將成為癌癥死亡的第二大原因。目前臨床上缺乏高靈敏度和高特異性的胰腺癌診斷標志物，microRNA是由17-25個核苷酸組成的非編碼RNA，在血液中相對穩(wěn)定，并與胰腺癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關。令人驚喜的是，康德生物科研團隊在Digestive Diseases and Sciences發(fā)表的文章，發(fā)現(xiàn)了4-microRNAs panel用于早期胰腺癌的診斷具有極大的臨床應用前景。

康德學術 | 準確度高！四個microRNA聯(lián)合檢測用于早期胰腺癌診斷

標志物篩選

選取300例回溯性臨床樣本，通過高密度基因芯片方法比較癌旁組織、早期癌變組織（胰腺上皮內(nèi)瘤變Ⅲ-ⅡA）及中晚期胰腺癌（>ⅡA）組織，篩選出143 種差異表達的microRNA，經(jīng)過優(yōu)化篩選確定了27種差異高表達miRNA分子，經(jīng)過3次臨床回溯性驗證，確定4種差異高表達的microRNA（hsa-miR-132-3p、hsa-miR-30c-5p、hsamiR-24-3p和hsa-miR-23a-3p）作為早期胰腺癌聯(lián)合診斷指標。

圖1. PDAC患者候選miRNA的表達水平

標志物驗證

為了確認這4種miRNAs是否可以作為診斷標志物，研究者在雙通道RT-PCR檢測1273名受試者其血清miRNAs表達水平，觀察到慢性胰腺炎（CP）和胰腺癌（PDAC）等其他胰腺疾病患者的水平顯著高于健康人HC，然而，hsa-miR-23a-3p水平在CP和HC患者之間并無明顯差異（p = 0.22）。與非PDAC患者相比，PDAC患者在早期（TNM期≤IIA）和晚期（TNM期＞IIA）中4種miRNAs均出現(xiàn)明顯的過表達。試驗表明，4種miRNAs具有早期診斷胰腺癌的潛力。

圖2.在組織和血清標本中驗證候選miRNA

在訓練隊列(n=635)中，4-miRNAs panel區(qū)分早期胰腺癌和非胰腺癌的靈敏度為93.8% (89.4%-98.2%)，特異度為75.7% (71.2%-80.2%)，準確度80.1% (80.1%-80.2%)，AUC為0.924。4-miRNAs panel區(qū)分早期胰腺癌和慢性胰腺癌的靈敏度為81.4% (74.2%-88.6%)，特異度為86.7% (76.7%-96.6%)，準確度82.9% (82.7%-83.1%)，AUC為0.905。區(qū)分早期胰腺癌和健康人的靈敏度為92.9% (88.2%-97.6%)，特異度為92.9% (89.3%-96.5%)，準確度92.9% (92.9%-92.9%)，AUC為0.971。

在驗證隊列(n=638)中，4-miRNAs panel區(qū)分早期胰腺癌和非胰腺癌的靈敏度為95.1% (91.0%-99.3%)，特異度為77.0% (72.7%-81.4%)，準確度81.1% (81.0%-81.2%)，AUC為0.861。4-miRNAs panel區(qū)分早期胰腺癌和慢性胰腺癌的靈敏度為80.6% (72.9%-88.2%)，特異度為82.2% (71.1%-93.4%)，準確度81.1% (80.9%-81.3%)，AUC為0.814。區(qū)分早期胰腺癌和健康人的靈敏度為94.2% (89.7%-98.76%)，特異度為92.4% (88.7%-96.1%)，準確度93.0% (93.0%-93.1%)，AUC為0.933。

圖3. 4-miRNAs panel在區(qū)分早期PDAC 患者和非PDAC 受試者（CP/HC）的性能

為了進一步證明4-miRNAs panel在早期PDAC檢測中的性能，研究人員將該面板與臨床應用中常規(guī)使用的四種生物標志物(CA125、CA19-9、CA242和CEA)進行了比較。結果顯示，4-miRNAs panel的總體表現(xiàn)明顯優(yōu)于常規(guī)用于區(qū)分早期PDAC受試者和非PDAC受試者、CP或HC的生物標志物(圖4)。

圖4. 4-miRNAs panel檢測胰腺癌的ROC

miRNA聯(lián)合檢測的特異性

為了評估4-miRNAs panel區(qū)分PCa和其他消化系統(tǒng)腫瘤的能力，研究者分別招募了結腸直腸癌(n=29)、肝癌(n=7)、食管癌(n=6)和胃癌(n=9)患者。其中，使用PDAC與非PDAC的鑒別模型將46例腫瘤預測為非pca，特異性為90.2%（表3）。這些數(shù)據(jù)表明了4-miRNAs panel可以區(qū)分胰腺癌和其他消化道腫瘤。

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研究結論

研究者針對早期PDAC患者和健康受試者展開了一項回顧性的臨床試驗，發(fā)現(xiàn)了4個miRNA組成的Panel（hsa-miR-132-3p、hsa-miR-30c-5p、hsamiR-24-3p和hsa-miR-23a-3p）可用于PDAC患者早期檢測，為miRNA用于早期診斷PDAC患者提供了強有力的證據(jù)。