尼帕病毒動(dòng)物模型構(gòu)建|受體EphrinB2和EphrinB3定點(diǎn)插入過表達(dá)小鼠

尼帕病毒（Nipah virus, NiV）是一種高致死性人畜共患病原體，對(duì)人類健康和公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。被世界衛(wèi)生組織列為優(yōu)先研究的重點(diǎn)病原體。果蝠（狐蝠）是該病毒的天然宿主。人類感染后初期表現(xiàn)非特異性：高熱、頭痛、肌痛、眩暈、嘔吐；數(shù)小時(shí)至數(shù)日內(nèi)迅速進(jìn)展為：急性呼吸窘迫、咳嗽、咽痛；腦炎樣征象：定向障礙、癲癇、肌陣攣、反射消失；重癥者24h–48h 內(nèi)陷入昏迷，需重癥監(jiān)護(hù)。部分康復(fù)者數(shù)月或數(shù)年后出現(xiàn)復(fù)發(fā)性/遲發(fā)性腦炎。主要爆發(fā)于馬來西亞、新加坡、孟加拉國、印度等地，死亡率高達(dá)40%-75%。目前沒有特效藥和疫苗。

尼帕病毒的感染機(jī)制

尼帕病毒是一種源自果蝠的人畜共患副黏病毒，負(fù)鏈、單股、不分節(jié)段的包膜RNA病毒，基因組編碼6種主要蛋白，其中F（融合）與G（附著）糖蛋白共同介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。病毒粒子表面的G糖蛋白先與宿主細(xì)胞膜上的 Ephrin B2（又稱EFNB2）或 Ephrin B3（又稱EFNB3）受體結(jié)合，觸發(fā)F糖蛋白構(gòu)象變化，使病毒與細(xì)胞膜融合，釋放核衣殼進(jìn)入胞質(zhì)完成復(fù)制；

圖1. 尼帕病毒結(jié)構(gòu)圖和宿主受體結(jié)合位點(diǎn)（引自文獻(xiàn)1）

尼帕病毒受體EphrinB2/B3定點(diǎn)插入過表達(dá)小鼠

馬元武課題組利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，將人EphrinB2和EphrinB3基因分別與K18啟動(dòng)子融合構(gòu)建表達(dá)載體定點(diǎn)插入到小鼠H11位點(diǎn)上，成功構(gòu)建了尼帕病毒受體EphrinB2和EphrinB3定點(diǎn)插入過表達(dá)小鼠。以下圖2、圖3為兩種基因編輯小鼠的構(gòu)建圖和WB鑒定結(jié)果：

圖2：EFNB2定點(diǎn)插入過表達(dá)小鼠構(gòu)建圖及WB鑒定結(jié)果

圖3：EFNB2定點(diǎn)插入過表達(dá)小鼠構(gòu)建圖及WB鑒定結(jié)果

該兩種模型可以用來進(jìn)行尼帕病毒入侵機(jī)制研究、藥物與疫苗開發(fā)等，目前兩種模型已經(jīng)匯交國家人類疾病動(dòng)物模型資源庫，歡迎廣大科研工作者使用！

資源庫郵箱：namr@cnilas.org、kejichu@cnilas.org

資源庫電話：010-67776529

參考文獻(xiàn)：

1. Ebrahimi M, Alijanianzadeh M. Evaluation of the interaction between potent small molecules against the Nipah virus Glycoprotein in Malaysia and Bangladesh strains, accompanied by the human Ephrin-B2 and Ephrin-B3 receptors; a simulation approach. Mol Divers. 2024 Apr;28(2):851-874. doi: 10.1007/s11030-023-10624-8. Epub 2023 Feb 20. PMID: 36808582; PMCID: PMC9939871.

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