【無菌附錄第七十八條】建立有效的潔凈區靜態與動態環境監測體系

無菌附錄條款：

第七十八條潔凈區級別確認是潔凈區確認的一部分。潔凈區的級別確認時應當分別測量≥0.5μm和≥5μm的顆粒的總數。測試需要在“靜態”和“動態”操作環境中進行。級別確認活動應當避免對工藝或產品質量造成任何影響。初始級別確認建議在模擬操作期間進行，重新級別確認建議在模擬操作期間或無菌工藝模擬試驗期間進行。

潔凈區確認的核心：動靜結合，雙粒徑監控。 遵循GMP第七十八條，潔凈區級別確認需在靜態（設施空載）與動態（模擬/實際生產）狀態下，同步測量≥0.5μm（系統性能指標）和≥5μm（污染風險指標）懸浮粒子濃度。此要求是評估環境控制有效性和建立科學監測標準的基礎。下面北京中邦興業小編，跟大家詳細分享一下相關條款的解讀。

核心概念：動態 vs 靜態

1. 靜態：

定義：設備已安裝完畢并按用戶和供應商同意的方式運行，但現場沒有操作人員。

目的：評估潔凈室本身在“空載”狀態下達到設計潔凈級別的能力（HVAC系統性能、建筑密封性等）。是級別確認的基礎。

要求：所有潔凈級別（A, B, C, D）都必須進行靜態測試以滿足相應級別的標準。

2. 動態：

定義：設施/設備以規定的操作模式運行，并且有規定數量的人員在場并以規定的方式進行操作的狀態。模擬或實際生產正在進行。

目的：評估在實際生產條件下（人員活動、設備運行、物料流動等干擾因素存在時）環境維持可接受狀態的能力。反映實際運行風險。

要求：

A級 & B級：必須進行動態監測以滿足其嚴格標準。

C級：通常也建議進行動態監測（雖然法規可能未像AB級那樣強制要求所有點位，但基于風險通常需要）。

D級：法規不規定統一的動態粒子限度標準（“不作統一規定”）。但這絕不等于不需要做動態監測（“不作規定≠不用做”）。企業必須根據風險評估和日常監測數據自行確定其動態可接受標準。

關鍵要求解讀與操作要點：

1. 級別確認（Qualification）：

顆粒物要求：必須測量 ≥0.5μm 和 ≥5μm 的懸浮粒子總數。

狀態要求：必須在 靜態 和 動態 兩種狀態下進行測試。

避免影響：確認活動本身不能對產品或工藝造成污染風險。

時機：

初始確認：推薦在模擬操作期間進行（如培養基灌裝前/期間）。

再確認：推薦在模擬操作期間或無菌工藝模擬試驗（培養基灌裝）期間進行。這能更真實反映生產狀態下的環境表現。

2. ≥5μm 顆粒物的作用：

如果有充分的CCS（污染控制策略）依據或歷史趨勢數據支持，可以將 ≥5μm 顆粒物水平作為潔凈區分級的參考標準之一。它通常與微生物污染風險關聯性更強。

3. D級動態限度的制定（核心難點）：

法規現狀：無全國/全球統一強制標準（“不作統一規定”）。

企業責任：必須自行制定科學合理的動態標準。依據是：

風險評估：基于生產工藝、產品特性、暴露風險等進行。

歷史數據：持續日常監測積累的數據是制定和修訂標準的基礎。

不作規定≠不用做”：必須進行D級動態監測！目的是收集數據、評估風險、建立標準、持續監控。

制定D級動態標準的策略：

監測點位評估：基于工藝風險評估確定哪些D級區域/點位需要監測以及監測頻率。高風險區域優先且標準更嚴。例如：

高風險：產品直接暴露、粒子可能進入產品且后續工序無法去除的區域（如配料、敞口容器轉運）。標準應從保護產品的需求反推。

中/低風險：非產品暴露區、有后續去除步驟的區域。標準可相對寬松。

首次確認：對于A/B級，在沒有歷史數據和明確CCS要求的情況下，首次確認主要是**測試并記錄數據（≥0.5μm & ≥5μm），無需立即設定嚴格的動態“通過/失敗”評價標準（但需滿足GMP附錄1靜態標準）。這些數據作為后續分析的基線。

日常環境監測：

持續收集數據：制定詳細的監測計劃（日期、房間、點位、項目 - 粒子、微生物、壓差、溫濕度等）。

計劃性：“當天無動態生產就不要安排（動態監測）計劃” - 動態監測只在有生產活動時進行。

CCS分析：

將環境監測數據（特別是粒子、微生物）與CCS的其他要素（如：微生物限度檢測結果/OOS/OOT、產品外觀檢查結果/OOS/OOT、無菌檢查結果、清潔驗證數據、人員監測數據、設備故障記錄等）關聯分析。

判斷環境監測數據是否預示或關聯了實際的污染風險（如：粒子數升高時微生物是否超標？特定點位微生物超標是否與產品染菌相關？）。

分析是否發現了潛在的上市后風險。

制定標準：

基于積累的歷史監測數據。

重點分析粒子監測數據與CCS識別的實際風險（如微生物污染、產品不合格）之間是否存在相關性。

如果發現顯著相關性：

例如：當 ≥5μm 粒子數超過某個水平時，微生物超標風險顯著增加，或產品不合格率上升。

則應根據這些歷史數據和風險關聯性，科學地（如使用統計方法）制定該點位的動態粒子限度標準（警戒限、行動限、法定限）。這個標準應能有效控制識別的風險。

標準是動態的：隨著數據積累、工藝變更、CCS優化，標準應定期回顧和修訂。

動態與靜態監測的意義

• 靜態（At Rest）：
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• 驗證“硬件”能力：主要驗證潔凈室基礎設施（建筑密封性）、空調凈化系統（HVAC）在安裝完畢、設備運行但無人員操作狀態下，是否能達到設計的潔凈度級別（如ISO 5/A級）。這是潔凈區基礎性能的證明。
• ≥0.5μm 是重點：靜態下≥5μm顆粒通常很少，重點在于確認HVAC系統對基礎粒徑（≥0.5μm）顆粒的控制能力是否達標。
• 動態（Operational/In Operation）：
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• 驗證“軟件”控制：模擬或實際生產過程中，評估在人員活動、設備運行、物料流動等干擾因素存在時，環境維持可接受狀態的能力。這反映了實際運行控制水平污染控制策略（CCS）的有效性。
• ≥5μm 更具風險指示性：動態下≥5μm顆粒的數量更能敏感地反映人員操作、設備運行、物料處理等引入的污染風險，是評估動態環境微生物污染潛在風險工藝控制穩健性的關鍵指標。這也是為什么在制定動態標準（尤其是D級）時，風險評估要重點考慮≥5μm顆粒與工藝/產品風險的關系。

采樣點選擇與采樣量

• 基于風險評估：采樣點的位置和數量應基于房間布局、氣流模式、關鍵操作位置、人員活動頻率、設備復雜性、產品暴露程度等進行風險評估后確定。關鍵區域（如A級送風下方、灌裝點、物料暴露點）和高風險區域是重點。
• 采樣量要求：為了獲得具有統計學意義的結果，特別是對于≥5μm顆粒（因其在潔凈空氣中濃度可能很低），每個采樣點的單次采樣空氣量必須足夠大。ISO 14644-1規定了根據潔凈度級別所需的最小采樣量（Vs）。例如：
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• 確認A級（ISO 5）：≥5μm粒子采樣量要求非常大（通常需要長時間采樣或大流量采樣器），以確保即使濃度很低也能檢測到（或確認低于限值）。
• 關鍵點：采樣量不足可能導致≥5μm顆粒“假陰性”（未測到不代表不存在），無法真實反映環境狀況。這是執行第七十八條時容易被忽視的技術細節。

設備與方法

• 離散粒子計數器（DPC）：必須使用校準合格的、能同時或分別計數≥0.5μm和≥5.0μm顆粒的光散射離散粒子計數器。
• 校準與合規：粒子計數器需定期（通常每年）由有資質的機構按照相關標準（如ISO 21501-4, JIS B 9921）進行校準，確保其測量精度和準確性。日常使用前可能需要進行自檢（如使用標稱粒徑的粒子挑戰）。
• 等動力采樣頭：在單向流（A級）區域采樣時，應使用等動力采樣頭，確保采樣氣流速度與主氣流速度匹配，避免采樣誤差。
• 潔凈室懸浮顆粒物監測：各類型激光塵埃粒子計數器的功能與選擇

數據記錄與報告

• 詳盡記錄：必須詳細記錄采樣日期、時間、地點（房間、具體點位坐標）、采樣狀態（靜態/動態）、采樣設備型號及編號、采樣流量、采樣時長、采樣量、各粒徑（≥0.5μm, ≥5.0μm）的粒子濃度（個/m3）、環境條件（溫濕度、壓差）等。
• 結果計算與判定：根據ISO 14644-1規定的方法計算每個采樣點的平均濃度，并與相應潔凈級別的限值進行比較。需要明確記錄每個點是否合格。
• 分級報告：級別確認報告應清晰說明潔凈區（或房間內不同區域）最終被確認達到的級別（A/B/C/D），該結論基于所有采樣點≥0.5μm和≥5.0μm顆粒的靜態和動態測試結果（均需滿足限值要求）。

與污染控制策略（CCS）的關聯

• 顆粒數據是CCS基石：≥0.5μm和≥5μm顆粒的監測數據是CCS的核心要素之一，為評估環境受控狀態提供客觀證據。
• 風險信號：≥5μm顆粒的動態數據異常升高（即使未超標），應視為潛在的風險信號，觸發調查，并可能需要評估其對微生物監測結果、產品無菌/微粒污染風險的影響。這也是第七十八條強調“根據風險評估和日常監測的數據確定動態限度”以及將≥5μm顆粒作為CCS或歷史數據依據進行分級參考的原因。
• 持續改進：長期監測這兩個粒徑的顆粒數據（尤其是動態數據），結合微生物監測、人員監測、壓差、溫濕度等數據，是評估CCS有效性持續改進環境控制措施的重要依據。

總結：

動靜皆需：級別確認和有效監控必須包含靜態和動態。

粒子雙測：≥0.5μm 和 ≥5μm 粒子是基本要求。

D級動態是重點難點：法規不統一規定，但企業必須做、必須管、必須定標。

風險是核心：D級動態監測的點位選擇、頻率設定、標準制定完全基于工藝風險評估。

數據是基礎：首次確認收集基線數據，日常監測持續積累數據。

CCS是紐帶：環境監測數據必須與CCS的其他風險控制措施和結果（微生物、產品檢驗OOS/OOT等）關聯分析，才能證明其價值并制定有意義的動態標準。

標準源于關聯：D級動態粒子標準（尤其是≥5μm）的制定，應基于歷史數據與CCS中識別的實際污染風險之間的相關性分析。

遵循“基于風險、數據驅動、關聯CCS”的原則，企業就能有效地建立和執行符合法規要求且能真正保障產品質量的潔凈區動態環境監測體系。