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斑馬魚因其透明胚胎、快速發(fā)育、高繁殖力、與人類高度保守的免疫系統(tǒng)等優(yōu)勢(shì),已成為研究炎癥和抗炎藥物篩選的重要模式生物。先天免疫系統(tǒng)在受精后24–48小時(shí)就已功能成熟,可模擬人類早期炎癥反應(yīng)。胚胎透明可實(shí)時(shí)觀察免疫細(xì)胞(如中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)遷移和聚集。只需將候選化合物溶于水中,魚體即可吸收,適合高通量藥物篩選。
誘導(dǎo)炎癥模型
十二烷基硫酸鈉(Sodium Lauryl Sulfate, SLS)是一種常用的陰離子表面活性劑,具有較強(qiáng)的去脂和刺激性,常被用于建立化學(xué)性皮膚炎癥模型。在斑馬魚研究中,SLS可通過浸泡方式高效、可重復(fù)地誘導(dǎo)幼魚皮膚發(fā)生急性炎癥反應(yīng)。
SLS破壞皮膚表層細(xì)胞膜和黏液屏障,造成表皮損傷;損傷激活先天免疫系統(tǒng),迅速招募嗜中性粒細(xì)胞至受損部位。
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選用48 hpf(小時(shí)受精后)的斑馬魚幼魚:此時(shí)皮膚屏障初步形成且免疫系統(tǒng)已具備功能。將幼魚浸泡于含SLS(常用濃度為30–100 μg/mL,如60 μg/mL)的水中。
處理時(shí)間:通常為數(shù)小時(shí)至24小時(shí)(如18小時(shí)),具體依實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼{(diào)整。
評(píng)估指標(biāo)
觀察行為變化(如活動(dòng)減少)或組織病理學(xué)改變。
熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)皮膚或卵黃囊區(qū)域的嗜中性粒細(xì)胞數(shù)量;
檢測(cè)炎癥相關(guān)基因表達(dá)水平;
優(yōu)勢(shì)
只需將SLS溶于養(yǎng)殖水,無需注射;
炎癥反應(yīng)快速、穩(wěn)定、可量化;
適用于抗炎藥物或天然產(chǎn)物的體內(nèi)篩選與評(píng)價(jià)。
參考文獻(xiàn)
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