云開(kāi)見(jiàn)日月，直上九天霞—IL-2的一路傳承和路線之爭(zhēng)

開(kāi)篇：呱呱墜地，一縷晨光

IL-2的發(fā)現(xiàn)

1960年，Nowell發(fā)現(xiàn)植物凝集素（lectins）能夠誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞增殖。隨后，1965年Gordon和MeLean以及Kasakura和Lowenstein發(fā)現(xiàn)，經(jīng)刺激后的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中存在可溶性的增殖因子。然而，這個(gè)階段，大多數(shù)研究者對(duì)淋巴因子并不感興趣，當(dāng)時(shí)普遍認(rèn)為淋巴因子只是“放大”因子，僅提供非特異性的營(yíng)養(yǎng)或代謝作用，雖然可能重要，但并非促進(jìn)DNA復(fù)制和有絲分裂的核心信號(hào)，而淋巴細(xì)胞的增殖過(guò)程主要由抗原觸發(fā)。

轉(zhuǎn)機(jī)出現(xiàn)在20世紀(jì)70年代，Doris Morgan、Francis Ruscetti和Robert Gallo以及Steven Gillis和Kendall Smith發(fā)現(xiàn)，激活的T細(xì)胞培養(yǎng)液中含有能誘導(dǎo)抗原激活的T細(xì)胞增殖的介質(zhì)。在隨后的幾年里，這種T細(xì)胞生長(zhǎng)因子被純化，其基因也被克隆，從而確定這種活性是由單一分子種類引起的。由于淋巴因子通常具有多種生物學(xué)功能，這種T細(xì)胞生長(zhǎng)因子被賦予了更通用的名稱—白細(xì)胞介素-2（IL-2）。

20世紀(jì)80年代，體外研究表明，通過(guò)T細(xì)胞受體（TCR）和共刺激分子（如CD28）激活T細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致IL-2的產(chǎn)生和IL-2受體（IL-2R）的表達(dá)。IL-2/IL-2R的相互作用隨后驅(qū)動(dòng)廣泛的克隆擴(kuò)增和效應(yīng)細(xì)胞發(fā)育。至此，IL-2開(kāi)始被置于T細(xì)胞依賴性免疫反應(yīng)的核心位置。

IL-2的生物學(xué)作用

IL-2是一種15.5–16 kDa的四螺旋細(xì)胞因子，通過(guò)與多種IL-2R結(jié)合發(fā)揮作用，尤其是單體、二聚體和三聚體IL-2R。下圖展示了人IL-2的A-D四螺旋分布及與三個(gè)受體IL-2Rα（CD25）、IL-2Rβ（CD122）、IL-2Rγ（CD132）結(jié)合表位。

單體IL-2R由CD25組成，通常與細(xì)胞膜結(jié)合，但也以可溶性形式存在，并以低親和力（Kd 約為10-8 M）結(jié)合IL-2。IL-2與CD25單獨(dú)結(jié)合不會(huì)誘導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)，因此，膜結(jié)合或可溶性的CD25分子可以作為IL-2的阻斷劑或誘餌受體。相反，二聚體和三聚體IL-2R在與IL-2結(jié)合時(shí)會(huì)引發(fā)下游信號(hào)傳導(dǎo)。二聚體IL-2R由CD122和CD132組成，而三聚體IL-2R由CD25、CD122和CD132組成。從受體親和力角度看，二聚體IL-2R可被視為低親和力（Kd 約為10-9 M）IL-2R，而三聚體IL-2R則為高親和力（Kd 約為10-11 M）IL-2R。說(shuō)明，CD25的其中一個(gè)功能是增強(qiáng)IL-2與二聚體IL-2R的結(jié)合。IL-2與IL-2R結(jié)合后，四元復(fù)合物內(nèi)化，其中IL-2、CD122和CD132在囊泡中被降解，而CD25則通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)回收至細(xì)胞表面。此外，體外激活的人T細(xì)胞每細(xì)胞攜帶約2000個(gè)高親和力和11000個(gè)低親和力IL-2R。了解IL-2R的受體類型非常重要，后續(xù)對(duì)天然IL-2的改造基本都是圍繞IL-2與三個(gè)受體的親和力偏向性展開(kāi)。

在IL-2R被觸發(fā)后，信號(hào)傳導(dǎo)主要通過(guò)三條途徑發(fā)生，1）JAK-STAT；2）PI3K-AKT；3）MAPK。此外，IL-2信號(hào)傳導(dǎo)激活Blimp1，由Prdm1編碼，它通過(guò)抑制IL-2的產(chǎn)生形成負(fù)反饋環(huán)。

二聚體IL-2R在記憶性CD8? T細(xì)胞和NK細(xì)胞上高表達(dá)，而記憶性CD4?和未成熟T細(xì)胞上則表達(dá)低至中等水平的二聚體IL-2R。在TCR刺激下，T細(xì)胞短暫上調(diào)CD25，從而表達(dá)三聚體IL-2R。除了激活的T細(xì)胞外，高表達(dá)三聚體IL-2R還存在于胸腺來(lái)源的Treg細(xì)胞上。此外，2型天然淋巴細(xì)胞（ILC2）和某些非免疫細(xì)胞（如肺內(nèi)皮細(xì)胞）已被報(bào)道表達(dá)低至非常低水平的三聚體IL-2R。從受體分布不難看出，IL-2的藥理作用是雙向的，既可以激活CD8? T細(xì)胞，增強(qiáng)免疫，又可以活化Treg，抑制免疫。另外，IL-2R在肺內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)也為天然IL-2的肺部毒性埋下了伏筆。

篇幅所限，本文主要圍繞IL-2在抗腫瘤免疫治療中的應(yīng)用展開(kāi)，不涉及自免方向。提到IL-2的腫瘤應(yīng)用，無(wú)論是出于尊重，還是敬佩，都不得不提一下美國(guó)NCI的Steven A. Rosenberg。Rosenberg博士是癌癥免疫治療領(lǐng)域的奠基人之一。他的研究推動(dòng)了IL-2作為免疫治療藥物的開(kāi)發(fā)，并首次證明了其在轉(zhuǎn)移性黑色素瘤和腎癌治療中的有效性。不僅如此，他還開(kāi)創(chuàng)了TIL療法，通過(guò)從患者腫瘤中提取TIL細(xì)胞，在體外擴(kuò)增后重新輸回患者體內(nèi)，顯著提高了抗腫瘤效果。而且，他在CAR-T治療B細(xì)胞惡性腫瘤中也有貢獻(xiàn)。這些成績(jī)，無(wú)論哪一項(xiàng)，都表現(xiàn)不俗，值得稱道和銘記。

IL-2的藥理毒理特征

天然IL-2的消除半衰期很短，C57BL/6小鼠靜脈注射后，血清半衰期不到10分鐘，有報(bào)道3.7±0.8分鐘，也有報(bào)道1.6±0.3分鐘的。總之，IL-2屬于高活性物質(zhì)，持續(xù)系統(tǒng)暴露，毒性太大，從自然選擇角度，機(jī)體似乎也不太允許這類物質(zhì)的過(guò)度暴露，體內(nèi)清除速度非常快。

再看下IL-2的動(dòng)物藥效表現(xiàn)。MCA-105是一種弱免疫原性的肉瘤，Rosenberg評(píng)估了IL-2對(duì)MCA-105小鼠肺轉(zhuǎn)移模型的影響。發(fā)現(xiàn)，3000、5000U劑量組，小鼠肺轉(zhuǎn)移灶體積縮小5%，2萬(wàn)和5萬(wàn)U劑量組縮小22%，1萬(wàn)和17萬(wàn)U劑量組則縮小79%。說(shuō)明，IL-2具備抗腫瘤潛力，且有劑量依賴性。另外，Rosenberg還發(fā)現(xiàn)連續(xù)給藥6d 抗腫瘤效果明顯好于給藥l 天或3 天，說(shuō)明維持用藥對(duì)于抗癌療效是至關(guān)重要的。這可能也是第一代IL-2臨床選擇短期內(nèi)大劑量推注療法的原因之一。

不僅肺癌，IL-2對(duì)MCA-105肝轉(zhuǎn)移、FBL-3小鼠播散性白血病、SL-2小鼠播散性淋巴瘤等多種腫瘤均有治療作用。而且，這種治療作用不僅是腫瘤生長(zhǎng)速度減慢那么簡(jiǎn)單，相當(dāng)比例的動(dòng)物出現(xiàn)了腫瘤消退，即臨床所對(duì)應(yīng)的腫瘤完全緩解（CR）。

關(guān)于腫瘤消退的機(jī)制已有不少研究。MCA-105肺轉(zhuǎn)移10天的小鼠，注射IL-2兩天后，腫瘤邊緣有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，且隨時(shí)間增加，淋巴浸潤(rùn)增加，同時(shí)腫瘤消退。小鼠事先經(jīng)過(guò)500cGy全身照射，或者事先選擇性去除淋巴細(xì)胞亞群，IL-2的抗腫瘤作用幾乎消失。另外，對(duì)于無(wú)免疫原性的腫瘤，或者稱為“冷腫瘤”，如MCA-101、MCA-102肉瘤，IL-2的治療效果也大打折扣，尤其是腫瘤負(fù)荷比較大的情況下。間接說(shuō)明，IL-2抗腫瘤藥效的發(fā)揮是依賴于淋巴細(xì)胞的。當(dāng)然，目前已經(jīng)研究的非常清楚，IL-2抗腫瘤作用發(fā)揮的核心細(xì)胞群體是CD8+T細(xì)胞。

藥物開(kāi)發(fā)只談藥效，不提毒性，肯定是說(shuō)不過(guò)去的。提到毒性，也就戳中了IL-2的傷心之處。IL-2在小鼠中出現(xiàn)了血管滲漏綜合征（表現(xiàn)為肺水腫、胸腔積液和腹水）、肝壞死、腎前性氮質(zhì)血癥、脾腫大、貧血、血小板減少癥。其中，肺水腫和全身血管滲漏綜合征是致命的主要原因。不僅小鼠，連續(xù)給藥12天，劑量超過(guò)2.7*106U/kg/d，可使大鼠可因肝壞死和貧血致死。猴體內(nèi)的毒性表現(xiàn)也類似，劑量超過(guò)2.3*106U/kg/d的IL-2，可引發(fā)血管滲漏綜合征、肺水腫、肝腎功能衰竭和低血壓而造成動(dòng)物死亡。

當(dāng)然，IL-2的毒性并非完全不可控，臨床有一定的干預(yù)措施。再加上20世紀(jì)80年代，除了化療，人們對(duì)癌癥并無(wú)太多有效辦法。更何況，IL-2在臨床前動(dòng)物模型中確實(shí)展現(xiàn)了不俗的抗腫瘤效果。所以IL-2后續(xù)被推進(jìn)到臨床階段，開(kāi)始了第一代IL-2的臨床探索之旅。

第一代IL-2：揚(yáng)帆啟航，曙光初現(xiàn)

1984年11月，一位33歲的女性黑色素瘤患者接受了重組IL-2的治療。此前，她已經(jīng)接受過(guò)多種治療，但病情仍在進(jìn)展。治療后一個(gè)月，她的一處腫瘤活檢顯示出現(xiàn)廣泛的壞死。兩個(gè)月后，她所有的腫瘤病灶開(kāi)始縮小，幾個(gè)月后，所有癌癥存在的跡象完全消失。此后29年，她一直無(wú)病生存。她是第一位對(duì)IL-2治療產(chǎn)生反應(yīng)的癌癥患者，也是第一位證明通過(guò)刺激T淋巴細(xì)胞的純免疫操作可以完全摧毀人類體內(nèi)大型、侵襲性、有血管的癌癥的患者。她和隨后接受IL-2治療的數(shù)千名患者在將免疫療法引入癌癥治療的主流中發(fā)揮了重要作用。相較于后來(lái)上市的CTLA-4、PD-1、PD-L1抗體，IL-2才是腫瘤免疫治療的“開(kāi)山鼻祖”了。

首個(gè)獲批的IL-2商品名Proleukin，也就是阿地白介素，由Chiron公司Cetus腫瘤分部生產(chǎn)。與天然IL-2 不同，rIL-2是非糖基化的，其位于氨基酸125 位點(diǎn)上的半胱氨酸由絲氨酸取代，同時(shí)缺乏帶有N末端的丙氨酸。rIL-2的生物學(xué)特性和功用與天然IL-2相似。不同公司的IL-2劑量單位不同，WHO進(jìn)行了統(tǒng)一，制定了IL-2的國(guó)際單位，1個(gè)Cetus單位等于6個(gè)國(guó)際單位，約等于2.3個(gè)Hoffmann-La Roche單位。

rIL-2在人體的半衰期比動(dòng)物略長(zhǎng)，初始α分布相半衰期7-13分鐘，緊接著是一個(gè)60-80分鐘的β消除相半衰期。較晚出現(xiàn)的延遲清除與IL-2初始快速布散于血管外空間，然后緩慢重新進(jìn)入血漿的雙室模型相一致。

有效性方面，By Gwendolyn Fyfe等人開(kāi)展了7項(xiàng)II期臨床研究，共入組255例轉(zhuǎn)移性腎癌患者，單藥治療，給藥劑量：0.044 mg/kg（2個(gè)試驗(yàn)）和 0.037 mg/kg（5個(gè)試驗(yàn)）；每次給藥時(shí)間為15min，間隔8小時(shí)，5天連續(xù)給藥14次，休息5-9天。結(jié)果顯示：ORR為14%（37例），PR為9%（24例），CR為5%（12例），PR患者持續(xù)緩解時(shí)間為19個(gè)月，CR患者持續(xù)有效。Michael B等人在1985年至1993期間8項(xiàng)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)，收集270例晚期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者，600000/720000IU/kg，輸注15min，間隔8小時(shí)，連續(xù)給藥5天，給藥14次，休息5-9天；疾病穩(wěn)定患者每6-12w重復(fù)給藥。結(jié)果顯示：ORR為16%（43例），CR為6%（17例），PR為10%（26例），中位緩解時(shí)間為8.9個(gè)月。

正是基于以上數(shù)據(jù)，F(xiàn)DA分別于1992年和1998年批準(zhǔn)rIL-2上市，用于轉(zhuǎn)移性腎癌和黑色素瘤的治療。這也迎來(lái)了初代IL-2的高光時(shí)刻。

不過(guò)，閃耀的背后，也潛藏著各種危機(jī)，制約了IL-2成為重磅炸彈級(jí)藥物的可能。

IL-2最重要的短板是毒性。這點(diǎn)在臨床前毒理研究中就已現(xiàn)端倪，臨床試驗(yàn)中進(jìn)一步凸顯。比如，轉(zhuǎn)移性腎癌患者中，低血壓發(fā)生率為96%，G4 占15%；心律失常發(fā)生率為15%，其中威脅生命的室性心動(dòng)過(guò)速少于1%；G3惡心和嘔吐24%，精神狀態(tài)異常23%，呼吸困難16%，膽紅素升高13%。255例腎癌患者中，11例死于給藥相關(guān)的毒性反應(yīng)，死亡率4%。黑色素瘤患者中，低血壓發(fā)生率64%，達(dá)到G4的為1%；室上性心動(dòng)過(guò)速發(fā)生率17%。270例黑色素瘤患者中，6例死于給藥相關(guān)的毒性，死亡率2.2%。

除了毒性，初代IL-2的給藥方式也不甚友好，由于半衰期短，需要每間隔8h輸注15分鐘，5天給藥14次。毒性和藥代動(dòng)力學(xué)兩塊短板成為下一代IL-2擬解決的關(guān)鍵課題。

第二代IL-2：再續(xù)輝煌，多點(diǎn)開(kāi)花

IL-2具有雙重作用。既可以促進(jìn)效應(yīng)T細(xì)胞的增殖，發(fā)揮抗癌作用。也會(huì)促進(jìn)Treg的生長(zhǎng)，而Treg是一種免疫抑制細(xì)胞，能夠抑制免疫系統(tǒng)的過(guò)度反應(yīng)。Treg表面高表達(dá)IL-2受體α，即CD25。另外，天然IL-2產(chǎn)生肺毒性的假說(shuō)之一是肺血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)CD25，IL-2與CD25的結(jié)合潛在與肺水腫相關(guān)。因此，降低或去除CD25的結(jié)合似乎是使天然IL-2更加“減毒增效”的改造方向之一，“not-alpha IL-2”也成為第二代IL-2研發(fā)熱潮中的主流。

這個(gè)方向當(dāng)年進(jìn)展最快的是Nektar Therapeutics公司開(kāi)發(fā)的NKTR-214這個(gè)分子。NKTR-214由與阿地白介素具有相同氨基酸序列的IL-2組成，其在蛋白質(zhì)的特定區(qū)域內(nèi)與可釋放的PEG鏈結(jié)合。PEG鏈?zhǔn)狗肿邮Щ睢ｓw內(nèi)給藥后，PEG鏈會(huì)緩慢水解，生成有活性的細(xì)胞因子結(jié)合物。其中最活躍的IL-2結(jié)合物是2-PEG-IL2和1-PEG-IL2。推測(cè)PEG鏈在活性結(jié)合IL-2上的位置降低了其與IL-2受體α亞基（IL2Rα）的親和力。

這款分子在早期臨床中的表現(xiàn)也不負(fù)眾望。2016年，NektarTherapeutics就與BMS達(dá)成合作，共同推進(jìn)NKTR-214與BMS PD-1抗體Opdivo在黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、結(jié)直腸癌、膀胱癌、非小細(xì)胞肺癌5種腫瘤類型的探索。2017年11月SITC會(huì)議，接受NKTR-214聯(lián)合Opdivo治療的36位晚期腫瘤患者中，72%的腫瘤都有縮小，總體有效率超過(guò)60%。2018年ASCO會(huì)議，進(jìn)一步更新了臨床1/2期研究（PIVOT-02）關(guān)鍵數(shù)據(jù)，一線治療尿路上皮癌、晚期腎細(xì)胞癌、黑色素瘤的客觀緩解率（ORR）分別達(dá)48%、46%、53%。以黑色素瘤為例，Opdivo單藥的ORR僅為34%左右。所以，聯(lián)合用藥的高ORR，使得NKTR-214在2018年成為了IL-2領(lǐng)域最靚的仔。高光時(shí)刻出現(xiàn)在2018年2月14日情人節(jié)這天，BMS和Nektar Therapeutics牽手成功，BMS付出了18.5億美元的首付款和高達(dá)17.8億美元的里程碑款作為彩禮，拿下NKTR-214共同開(kāi)發(fā)和商業(yè)化的權(quán)利。

無(wú)獨(dú)有偶，THOR-707也是一款PEG化的not-alpha IL-2產(chǎn)品。通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)方法將一種新的非天然氨基酸與PEG鏈不可逆地結(jié)合，使其不與IL-2Rα亞單位結(jié)合，但保留了對(duì)IL-2Rβγ亞單位的近天然親和力。2019年，這款產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)企業(yè)Synthorx被法國(guó)制藥巨頭Sanofi以25億美金收購(gòu)。賽諾菲對(duì)THOR-707這款產(chǎn)品寄予厚望，認(rèn)為其有望成為下一代免疫腫瘤學(xué)聯(lián)合療法的基礎(chǔ)。

IL-2領(lǐng)域的迅速升溫，也吸引了一些國(guó)內(nèi)生物醫(yī)藥企業(yè)的目光。根據(jù)公開(kāi)資料顯示：2020年8月，君實(shí)生物與北京志道生物簽署了一項(xiàng)關(guān)于分子內(nèi)二硫鍵IL-2藥物的技術(shù)許可合同，以首付款2100萬(wàn)元和累計(jì)9.38億人民幣的里程碑款的價(jià)格引入一款not-alpha IL-2。該IL-2通過(guò)在分子內(nèi)部引入額外的二硫鍵，消除了與IL-2Rα的結(jié)合。這種設(shè)計(jì)不僅使IL-2結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，還可以形成屏障，破壞與α受體的結(jié)合平面，從而降低免疫抑制作用，同時(shí)保留與β和γ受體亞基的結(jié)合能力，屬于經(jīng)典的not-alpha IL-2類偏向型分子。

除了以上產(chǎn)品，還有大量not-alpha IL-2在研，包括Alkermes公司的ALKS-4230、Neoleukin的NL-201、Anaveon的ANV419、Medicenna的MDNA11、Aulos的AU007、Ascendis Pharma的TransCon IL-2 β/γ、江蘇恒瑞的SHR-1916、上海邁威的8MW2311等等。

當(dāng)然，所謂的第二代not-alpha IL-2只是業(yè)內(nèi)的大致劃分，代表了第一代阿地白介素之后的主流改造思路。既然是主流，自然也有其它路線，比如非偏向性IL-2路線、CD25/CD122偏向性路線等。比如斯坦福大學(xué)的分子生物學(xué)大牛Garcia，其團(tuán)隊(duì)在2005年《科學(xué)》雜志上報(bào)告了完整的IL-2受體復(fù)合物的結(jié)構(gòu)。早在2012年，Garcia團(tuán)隊(duì)就披露過(guò)一款I(lǐng)L-2 superkine，也叫super 2，這款分子通過(guò)點(diǎn)突變，增加了IL-2的穩(wěn)定性，降低了IL-2與CD122結(jié)合表位的靈活性，提高了與CD122的親和力。從時(shí)間上看，Super-2其實(shí)才算是第一代CD122偏向性分子，雖然不是not-alpha，但該分子對(duì)alpha受體的依賴性下降。該分子應(yīng)該僅停留在了臨床前階段，沒(méi)有繼續(xù)推進(jìn)。不過(guò)，Garcia并未放棄IL-2方向的繼續(xù)探索，在2019年創(chuàng)立了Synthekine，該公司開(kāi)發(fā)了一款STK-012的IL-2分子。STK-012是一款降低了CD132親和力，CD25/CD122偏向性的IL-2設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)原理是NK細(xì)胞和Na?ve T細(xì)胞表達(dá)低豐度CD132，且與IL-2毒性相關(guān)，且抑制免疫的Treg也表達(dá)低豐度IL-2，相反，識(shí)別腫瘤抗原的活化的CD8+T細(xì)胞則高表達(dá)CD132，故降低CD132親和力并不影響分子的藥效，同時(shí)能減毒。Synthekine認(rèn)為該分子比第二代not-alpha IL-2更有優(yōu)勢(shì)。究竟屬于第二代還是下一代，各說(shuō)各話，也不必過(guò)于糾結(jié)。本文就暫且將not-alpha IL-2定為第二代。

第二代IL-2：一落千丈，跌入谷底

花無(wú)百日紅，月無(wú)長(zhǎng)圓時(shí)。IL-2這個(gè)系列的藥物就像事先有劇本似的，從巔峰到低谷并未經(jīng)歷太久。本有希望在后PD-1時(shí)代創(chuàng)造一個(gè)新的時(shí)代的IL-2，在2022年迎來(lái)了至暗時(shí)刻。這個(gè)賽道最風(fēng)光的是NKTR-214，最先隕落的也是這個(gè)分子。

2022年3月14日，NKTR-214聯(lián)合Opdivo治療不可切除或轉(zhuǎn)移性的黑色素瘤的三期臨床試驗(yàn)（PIVOT IO-001）顯示，相對(duì)Opdivo單藥，聯(lián)合治療在OS、PFS、ORR等臨床指標(biāo)上均未達(dá)到終點(diǎn)。信息披露當(dāng)天，Nektar Therapeutics公司股票跌去60%。2022 年 4 月 14 日，在對(duì) NKTR-214 聯(lián)合 Opdivo 治療腎癌3期臨床、膀胱癌2期臨床研究提前分析后，BMS 與 Nektar 宣布終止 NKTR-214+Opdivo聯(lián)合治療的所有臨床研究。NKTR-214徹底失敗。

2022年ESMO會(huì)議上，NKTR-214和Opdivo聯(lián)合用于一線黑色素瘤和腎癌的3期臨床數(shù)據(jù)最終披露。先看下一線黑色素瘤，NKTR-214+Opdivo聯(lián)用組與Opdivo單藥組的ORR分別為27.7%、36%，中位PFS分別為4.17個(gè)月、4.99個(gè)月，中位OS分別為29.67、28.88個(gè)月，3-4級(jí)AE發(fā)生率分別為21.7%、10.1%。再看下一線晚期腎細(xì)胞癌，NKTR-214+Opdivo聯(lián)用組與舒尼替尼或卡博替尼等TKI組的ORR分別為23%、30.6%，中位OS分別為29個(gè)月、未達(dá)到。綜合以上，不難看出，NKTR-214+Opdivo這對(duì)組合相比于標(biāo)準(zhǔn)治療，并未見(jiàn)任何額外獲益。

2024年7月，BMS聯(lián)合了來(lái)自十幾個(gè)不同國(guó)家的機(jī)構(gòu)進(jìn)一步披露了NKTR-214聯(lián)合Opdivo給藥后臨床免疫特征譜的變化。這些PD指標(biāo)其實(shí)對(duì)前期令人失望的臨床有效性結(jié)果做了很好的解釋。NKTR-214+Opdivo聯(lián)合給藥組較Opdivo單藥組，外周血絕對(duì)免疫細(xì)胞數(shù)量確實(shí)增加。不過(guò)，如下圖所示，Treg增加了8-10倍，CD8+T細(xì)胞增加了2倍，NK細(xì)胞增加了1.5-3倍。而且，隨著給藥時(shí)間的推移，至第5個(gè)給藥周期，CD8+T細(xì)胞的增殖幅度大幅度降低，Treg依然保持第一周期的高比例擴(kuò)增。那么這款not-alpha IL-2產(chǎn)品為什么反而會(huì)更大幅度的促進(jìn)Treg增殖呢？BMS認(rèn)為其中一個(gè)可能性是PEG從NKTR-214脫落時(shí)，有游離的未攜帶任何PEG的IL-2產(chǎn)生。再直白些講，可能會(huì)有低濃度的阿地白介素出現(xiàn)。而眾所周知，低濃度IL-2優(yōu)先結(jié)合含有IL-2高親和力三聚體受體的Treg。

再看下細(xì)胞因子變化情況。NKTR-214+Opdivo、Opdivo給藥組的IFN-γ分泌均升高，前者幅度更大。另外，NKTR-214+Opdivo給藥組IL-10和IL-5明顯升高。而且，第5給藥周期和第1周期相比，NKTR-214+Opdivo給藥組IFN-γ分泌下降，IL-10和IL-5繼續(xù)升高。所有細(xì)胞學(xué)和細(xì)胞因子結(jié)果均指向外周似乎形成了一個(gè)免疫抑制更強(qiáng)的環(huán)境。這可能是NKTR-214+Opdivo聯(lián)合給藥組在多個(gè)瘤種中相繼折戟的根本原因。

NKTR-214失敗帶來(lái)了一系列連鎖效應(yīng)。2022年10月，賽諾菲宣布停止了其IL-2產(chǎn)品THOR-707的臨床2期研究，理由是藥效不及預(yù)期。NL-201是一款de novo全新設(shè)計(jì)的IL-2產(chǎn)品，2021年5月剛進(jìn)入臨床1期。2022年11月，Neoleukin Therapeutics宣稱考慮到近期IL-2領(lǐng)域的進(jìn)展，決定終止本品的開(kāi)發(fā)。Alkermes公司的ALKS4230倒沒(méi)有被NKTR-214的臨床失敗而嚇倒，在鉑類耐藥卵巢癌試驗(yàn)（ARTISTRY-1）中，ALKS4230聯(lián)用PD-1抗體Keytruda看到了不錯(cuò)的數(shù)據(jù)，14例患者，2例CR，2例PR，ORR為28.6%，DCR為71.4%。在IL-2的不利之年2022年，毅然啟動(dòng)了該適應(yīng)癥的臨床3期研究。同時(shí)啟動(dòng)的還有單藥治療皮膚和粘膜黑色素瘤的臨床2期研究。可惜傳來(lái)的依然是噩耗，2025年3月25日Mural Oncology（2023年從Alkermes分拆所得）更新的數(shù)據(jù)顯示，在鉑類耐藥卵巢癌患者中，ALKS4230和Keytruda聯(lián)用組對(duì)比化療組的中位OS分別為10.1個(gè)月、9.8個(gè)月，HR為0.98，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)然，黑色素瘤的2期臨床研究依然在繼續(xù)推進(jìn)。另外，Anaveon公司也已經(jīng)將其前幾年主推的not-alpha IL-2產(chǎn)品ANV419悄然從官網(wǎng)撤下，轉(zhuǎn)而將資源投放給PD-1/IL-2候選分子ANV600，給出的理由是ANV419可能對(duì)腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞激活不充分，導(dǎo)致單藥藥效有限，希望通過(guò)PD-1抗體的加持強(qiáng)化TIL的激活。

IL-2末法時(shí)代：向死而生，鳳凰涅槃

雖然not-alpha IL-2栽了很大的跟頭，盡管并行的類似作用機(jī)制的IL-15藥物開(kāi)發(fā)也步履維艱，但I(xiàn)L-2這個(gè)系列的演出尚未落幕。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全球至少還有超過(guò)30款I(lǐng)L-2處于臨床活躍狀態(tài)。如下圖所示，根據(jù)各自特點(diǎn)，大致分為非靶向、腫瘤細(xì)胞靶向、腫瘤微環(huán)境靶向和免疫細(xì)胞靶向4大類。這也是IL-2殘存的孤勇者，在這條道路一片灰暗的背景下奮勇向前，探索一條適合IL-2的登頂之路。

非靶向IL-2

非靶向IL-2里面進(jìn)展比較快的是來(lái)自國(guó)內(nèi)志道生物的LTC004。LTC004最大的特點(diǎn)來(lái)自其較高的安全性，非臨床研究顯示，這款產(chǎn)品的細(xì)胞學(xué)活性強(qiáng)于天然IL-2，且在食蟹猴中的MTD高達(dá)5mg/kg。臨床1期研究顯示，劑量爬升至360μg/kg時(shí)，依然未見(jiàn)DLT出現(xiàn)，最常見(jiàn)AE為發(fā)熱，整體安全可控。LTC004通過(guò)融合Fc實(shí)現(xiàn)半衰期延長(zhǎng)和低給藥頻次。而反觀NKTR-214、THOR-707、ALKS4230這些分子，臨床給藥劑量分別為6μg/kg、16-24μg/kg、6μg/kg，均遠(yuǎn)低于LTC004。而細(xì)胞因子的臨床藥效明顯具有劑量相關(guān)性，這點(diǎn)從早期Rosenberg團(tuán)隊(duì)開(kāi)展的動(dòng)物相關(guān)研究，到后續(xù)ANV419（另外一款not-alpha IL-2），再到信達(dá)生物的IBI363（一款PD-1/IL-2分子，后續(xù)介紹），都得以反復(fù)證實(shí)。即使是第一代的Proleukin，也是將劑量給到了44μg/kg，且患者承受嚴(yán)重不良反應(yīng)甚至有一定死亡率的情況下，大力出現(xiàn)的奇跡。

其它非靶向IL-2方面，ALKS4230前文已有介紹，正在開(kāi)展黑色素瘤2期研究，預(yù)計(jì)今年更新數(shù)據(jù)。TransCon IL-2β/γ也是一款PEG技術(shù)not-alpha IL-2，1期臨床爬升到160μg/kg出現(xiàn)DLT事件，選擇了20、40、80、120μg/kg共計(jì)4個(gè)劑量與PD-1抗體聯(lián)用進(jìn)行擴(kuò)組。TransCon IL-2β/γ臨床設(shè)計(jì)比較有想法，直接單藥或聯(lián)用PD-1抗體或TLR7/8激動(dòng)劑殺向黑色素瘤新輔助治療或NSCLC新輔助治療，這些患者的免疫系統(tǒng)還未經(jīng)化療或其它藥物破壞，免疫狀態(tài)相對(duì)較好。意大利Philogen的IL-2/TNFα就是從黑色素瘤新輔助治療找到的突破口，拿到了不錯(cuò)的數(shù)據(jù)，并遞交了上市申請(qǐng)。不僅如此，TransCon IL-2β/γ在鉑類耐藥卵巢癌、2線及以上宮頸癌、PD-1抗體治療進(jìn)展的黑色素瘤適應(yīng)癥中也在探索。MDNA11是一款白蛋白偶聯(lián)的not-alpha IL-2，臨床1期爬坡也達(dá)到了120μg/kg的劑量，最后選擇了90μg/kg進(jìn)行擴(kuò)組，正在開(kāi)展與PD-1抗體聯(lián)用在黑色素瘤患者中的臨床研究。AU007是一款I(lǐng)L-2的抗體，通過(guò)結(jié)合IL-2，阻斷IL-2與CD25的結(jié)合。這款分子的設(shè)計(jì)原理不只是阻斷外源性IL-2與CD25結(jié)合，同時(shí)阻斷體內(nèi)活化的CD8+T細(xì)胞分泌的內(nèi)源性IL-2與CD25的結(jié)合。理想情況下，Treg應(yīng)該被最大程度抑制。2024年ASCO披露的數(shù)據(jù)顯示，本品通過(guò)與阿地白介素聯(lián)用，在2例黑色素瘤、1例鼻咽頭頸部癌看到了PR，1例膀胱癌PET掃描中觀察到完全代謝緩解，在NSCLC和腎細(xì)胞中看到腫瘤明顯縮小跡象。后續(xù)選擇在黑色素瘤、NSCLC和腎細(xì)胞癌中繼續(xù)進(jìn)行擴(kuò)組研究。所以說(shuō)，not-alpha IL-2的火種還未完全熄滅，還有企業(yè)在做不同臨床設(shè)計(jì)和應(yīng)用場(chǎng)景的嘗試。

再提一下Garcia大神團(tuán)隊(duì)的STK012，根據(jù)2023年AACR披露的數(shù)據(jù)，這款產(chǎn)品臨床1期劑量爬升至3mg/人，最后選擇2.25mg/人（按照60kg計(jì)，約37.5μg/kg）作為RP2D劑量。臨床1期入組的40例晚期實(shí)體瘤患者中，3例PR，12例SD。后續(xù)1b期研究，選擇在NSCLC和腎細(xì)胞癌中繼續(xù)探索。本品的隱患是，外周血Treg升高倍數(shù)明顯比CD8+T細(xì)胞更高，只能寄希望于抗原特異性活化的CD8+T細(xì)胞發(fā)揮奇效。

非靶向IL-2除了not-alpha設(shè)計(jì)、αβ偏向性設(shè)計(jì)，還有一類β偏向性設(shè)計(jì)思路，比如美國(guó)Dragonfly的DF6215和韓國(guó)韓美藥業(yè)的HM16390，這兩款產(chǎn)品均是通過(guò)降低分子與α受體親和力、提高β受體親和力，旨在提高對(duì)腫瘤特異性T細(xì)胞的選擇性激活。由于腫瘤微環(huán)境中活化的CD8+T細(xì)胞高表達(dá)α受體，α受體對(duì)于IL-2的抗腫瘤貢獻(xiàn)越來(lái)越受到關(guān)注。不過(guò)，這兩款產(chǎn)品還處于臨床1期階段，尚無(wú)臨床數(shù)據(jù)披露。

BioNTech的BNT151、BNT153，艾森藥業(yè)的STI-7349均是mRNA編碼的IL-2，屬于基因治療產(chǎn)品，目前均在早期臨床階段，尚無(wú)數(shù)據(jù)披露。

腫瘤細(xì)胞靶向IL-2

腫瘤細(xì)胞靶向IL-2通常指的是結(jié)合腫瘤抗原的抗體與IL-2的融合分子，通過(guò)抗體的靶向作用將IL-2遞送至腫瘤微環(huán)境發(fā)揮作用。這個(gè)方向做的比較早的是一款靶向GD2的抗體/IL-2融合分子—hu14.18-IL2，GD2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤高表達(dá)。這款產(chǎn)品早在2001年就進(jìn)入臨床1期研究，主要探索在兒童神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的作用。2010年披露的數(shù)據(jù)顯示，本品對(duì)大塊腫瘤（bulky disease）的神經(jīng)母細(xì)胞瘤兒童患者無(wú)效。時(shí)至今日，也未見(jiàn)有積極臨床數(shù)據(jù)披露。

羅氏早期也做過(guò)一款腫瘤靶向IL-2，通過(guò)靶向CEA的抗體融合一款CD122偏向性IL-2，即RG7813（Cergutuzumab Amunaleukin,），由于臨床試驗(yàn)中缺乏療效而放棄。

壞死的腫瘤細(xì)胞會(huì)釋放DNA，德國(guó)默克早年開(kāi)發(fā)過(guò)一款靶向DNA的IL-2，即NHS-IL-2LT（EMD 521873, Selectikine）。早在2006年就進(jìn)入了臨床階段，早期臨床研究顯示MTD為0.6mg/kg。后續(xù)嘗試過(guò)NSCLC和黑色素瘤，2014年前后陸續(xù)停止更新動(dòng)態(tài)了，應(yīng)該是臨床效果不佳。

目前腫瘤靶向IL-2領(lǐng)域比較活躍的至少還有兩類分子，一類是美國(guó)DEKA biosciences的DK210(EGFR)，一類是美國(guó)CUE biopharma的CUE-101、CUE-102。DK210(EGFR)由靶向EGFR的ScFv抗體、野生型IL-2和IL-10組成。IL-10的作用是降低IL-2引起的細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS），抑制Treg增殖。從2024年ASCO披露的數(shù)據(jù)看，本品皮下給藥，每周3次，0.025-0.5mg/kg劑量探索，未見(jiàn)DLT，常見(jiàn)AE為注射部位反應(yīng)、發(fā)熱、乏力、惡心、腹瀉。17例患者中（8例結(jié)直腸癌、5例胰腺癌、4例NSCLC），最佳療效是4例SD（2例結(jié)直腸癌、1例胰腺癌、1例NSCLC）。在傳統(tǒng)EGFR單抗獲批的瘤種（胰腺癌除外）中，似乎也未看到預(yù)期的效果。未來(lái)DK210(EGFR)將在NSCLC和腎細(xì)胞癌中繼續(xù)探索。

CUE-101結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，如下圖所示，由來(lái)自HPV16 E7蛋白的多肽表位HLA-A*0201、4個(gè)分子的活性減弱版IL-2和人IgG1 Fc組成，可以特異性結(jié)合、擴(kuò)增、激活HPV16陽(yáng)性CD8+T細(xì)胞，目標(biāo)適應(yīng)癥是HPV16+人頭頸鱗癌。

2024年ASCO數(shù)據(jù)顯示，CUE-101首次人體臨床試驗(yàn)在HPV16+頭頸鱗癌中開(kāi)展。探索得到RP2D劑量4mg/kg。進(jìn)一步擴(kuò)展研究顯示，一線PD-L1+頭頸鱗癌患者，19例CUE-101 RP2D劑量聯(lián)用PD-1抗體，ORR為47%（1例CR，8例PR），DCR為74%，中位PFS為5.8個(gè)月。相比之下，Keytruda單藥一線治療PD-L1+頭頸鱗癌患者的ORR和中位PFS分別為19%、3.2個(gè)月。≥1線鉑類治療或免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療耐藥的頭頸鱗癌患者，19例CUE-101 RP2D劑量下單用，1例PR，6例SD，中位OS為20.8個(gè)月。相比之下，Opdivo治療≥1線鉑類治療耐藥的頭頸鱗癌患者的中位OS僅7.5個(gè)月。

CUE-102結(jié)構(gòu)與CUE-101類似，只不過(guò)識(shí)別的腫瘤抗原變成了WT1。臨床1期結(jié)果顯示，在HLA-A*02:01陽(yáng)性WT1+腫瘤中，23例患者中最佳療效是10例SD。

腫瘤微環(huán)境靶向IL-2

腫瘤微環(huán)境（TME）是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)，由多種細(xì)胞類型、細(xì)胞外基質(zhì)、血管系統(tǒng)、可溶性因子等組成。通過(guò)靶向TME中的特定組分，實(shí)現(xiàn)IL-2在腫瘤中的富集或活化，是IL-2的開(kāi)發(fā)策略之一。

其實(shí)，羅氏早年在這個(gè)方向就做過(guò)嘗試，開(kāi)發(fā)了一款靶向FAP/not-alpha IL-2產(chǎn)品，名為RG7461或Simlukafusp Alfa。FAP在正常組織中表達(dá)量很低，但在TME中的腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）中高度過(guò)表達(dá)。臨床1期探索了10、15、20mg單藥或者10mg劑量與PD-L1抗體atezolizumab聯(lián)用的安全性、耐受性。11例患者入組，2例患者因治療相關(guān)的AE終止用藥，1例出現(xiàn)低血壓、輸注反應(yīng)和血管滲漏綜合征，1例出現(xiàn)肝毒性。另外，在15/20mg劑量下，1例患者出現(xiàn)3級(jí)低血壓的DLT事件。2024年，羅氏宣稱出于管線優(yōu)先級(jí)考慮，停止這個(gè)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)。

目前TME靶向IL-2進(jìn)展最快的是來(lái)自意大利Philogen公司開(kāi)發(fā)的Nidlegy。嚴(yán)格意義上講，Nidlegy并不是一個(gè)IL-2單體，而是由兩個(gè)分子混合而成，一個(gè)是L19與IL-2融合蛋白，另外一個(gè)是L19與TNFα融合蛋白。L19抗體的靶點(diǎn)是纖連蛋白（Fibronectin）的Extra Domain B，而TME中富含fibronectin。

PIVOTAL是一項(xiàng)Ⅲ期隨機(jī)、對(duì)照、國(guó)際多中心臨床研究，旨在考察Nidlegy對(duì)局部晚期、可切除的黑色素瘤的新輔助治療。Nidlegy為瘤內(nèi)注射，每周1次，手術(shù)前共給藥4次。在歐洲包括德國(guó)、意大利、法國(guó)和波蘭在內(nèi)的22個(gè)臨床研究機(jī)構(gòu)入組256例患者。患者按照1:1比例接受新輔助Nidlegy+手術(shù)（治療組）、手術(shù)治療（對(duì)照組）。主要終點(diǎn)RFS（Relapse Free Survival，無(wú)復(fù)發(fā)生存期），次要終點(diǎn)DMFS（distant metastasis-free survival，無(wú)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移生存期）和安全性。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，基于BICR測(cè)定，治療組和對(duì)照組的RFS HR為0.59（95% CI 0.41-0.86; log-rank p=0.005）。基于研究者測(cè)定（power = 85%; two-sided α = 0.05），治療組和對(duì)照組的RFS HR為0.61（0.41-0.92; log-rank p=0.018）。基于BICR測(cè)定，治療組和對(duì)照組的中位RFS分別為16.7個(gè)月、6.9個(gè)月。另外，DMFS也明顯改善，兩組的HR為0.60（0.37-0.95; p=0.029）。安全性方面，Nidlegy的不良反應(yīng)大都是低等級(jí)的局部不良事件（3級(jí)治療相關(guān)不良反應(yīng)12.7%）。未見(jiàn)3-4級(jí)免疫相關(guān)不良反應(yīng)，未見(jiàn)給藥相關(guān)死亡事件。

基于以上Ⅲ期臨床研究數(shù)據(jù)，2024年6月4日，Philogen公司已經(jīng)向歐洲藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)EMA遞交了Nidlegy的上市申請(qǐng)。

此外，還有XTX202、WTX-124、PTX-912三款TME靶向IL-2在研，三款產(chǎn)品均采用的前藥技術(shù)，在TME特定環(huán)境中活化。XTX202、WTX-124的其中一點(diǎn)區(qū)別是前者采用的not-alpha IL-2，后者連接的天然IL-2。前藥的目的是往體內(nèi)遞送更多的IL-2分子，從臨床結(jié)果看，XTX202患者可以耐受4mg/kg，WTX-124人體最大耐受劑量應(yīng)該在12mg/人（按照60kg/人計(jì)，約200μg/kg）。當(dāng)然，二者偶聯(lián)的IL-2活性也不一樣。從早期臨床藥效看，XTX202在80例晚期實(shí)體瘤患者中DCR約為41.3%，未見(jiàn)PR或者CR。WTX-124單藥治療的27例患者中，2例PR，1例CR，8例SD。二者安全性表現(xiàn)均不錯(cuò)，大多數(shù)AE均為1-2級(jí)。不過(guò)，似乎并未看到前藥所帶來(lái)的療效改善。前藥技術(shù)的難點(diǎn)在于如何確保非活性的前藥能夠在腫瘤中精確、定量的活化，轉(zhuǎn)化為足夠量的活性成分。無(wú)論是毒性比較大的CTLA-4靶點(diǎn)，還是T細(xì)胞連接器這類分子，都有前藥設(shè)計(jì)思路在探索，目前為止還沒(méi)有分子完成臨床POC。

免疫細(xì)胞靶向IL-2

免疫細(xì)胞靶向是目前IL-2研究領(lǐng)域關(guān)注比較多，比較熱的方向之一。這里面根據(jù)PD-1抗體是否具備阻斷功能、IL-2的偏向性又細(xì)分為幾種不同的策略。

這里不得不致敬下羅氏制藥，羅氏在IL-2領(lǐng)域真的是前前后后投入了很多資源，啟動(dòng)了多個(gè)項(xiàng)目，做了大量嘗試，堅(jiān)信IL-2領(lǐng)域會(huì)出現(xiàn)一款抗腫瘤良藥。除了腫瘤靶向、腫瘤微環(huán)境靶向，羅氏在免疫細(xì)胞靶向IL-2領(lǐng)域也有布局，而且是比較早進(jìn)入這個(gè)領(lǐng)域的先行者。羅氏在2022年（Nature）和2023年（Oncoimmunology）連續(xù)發(fā)表兩篇文章為PD-1 cis-targeting of an IL-2Rβγ-biased IL-2的設(shè)計(jì)理念提供依據(jù)。這種設(shè)計(jì)的示意圖如下所示，PD-1抗體先結(jié)合效應(yīng)T細(xì)胞，之后攜帶的IL-2順式結(jié)合IL-2 Rβγ。羅氏給出的邏輯是基于PD-1抗體成功經(jīng)驗(yàn)，經(jīng)腫瘤抗原處理的PD-1+TCF-1+干細(xì)胞樣CD8+T細(xì)胞的擴(kuò)增和分化對(duì)于腫瘤的殺傷至關(guān)重要。IL-2有利于生成這類干細(xì)胞，但需要借助IL-2Rα，也就是CD25，才能實(shí)現(xiàn)。融合PD-1抗體的not-alpha IL-2通過(guò)順式結(jié)合，可以擺脫對(duì)CD25的依賴，恢復(fù)干細(xì)胞樣CD8+ T細(xì)胞分化為更好效應(yīng)細(xì)胞的能力。

羅氏不僅肯定了這種順式結(jié)合的優(yōu)勢(shì)，還順帶提到了反式（Trans）結(jié)合的缺點(diǎn)，比如前文提到的FAP-IL-2就是反式結(jié)合。如下圖所示，反式結(jié)合會(huì)使干細(xì)胞樣CD8+ T細(xì)胞往耗竭型T細(xì)胞狀態(tài)分化，算是間接回應(yīng)了FAP-IL-2臨床失敗及停止開(kāi)發(fā)的原因。當(dāng)然，如果這個(gè)邏輯成立，腫瘤細(xì)胞靶向的IL-2也存在類似風(fēng)險(xiǎn)。

羅氏自己開(kāi)發(fā)的PD-1/IL-2Rβγ-biased IL-2產(chǎn)品（RG6279, eciskafusp alfa）在2020年就已經(jīng)推進(jìn)到臨床研究階段。不過(guò)此后一直未見(jiàn)臨床數(shù)據(jù)披露。更為微妙的是2025年RG6279新開(kāi)了一項(xiàng)臨床研究，經(jīng)膀胱給藥與BCG聯(lián)用治療非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌。這是IL-15超級(jí)激動(dòng)劑N-803上市選擇的一個(gè)小適應(yīng)癥。由此，不免讓人猜想，與N-803類似，RG6279的外周毒性太大，給藥劑量受到限制，轉(zhuǎn)而選擇局部給藥的膀胱癌適應(yīng)癥。此外，2022年9月，羅氏還花了2.5億美元從Good Therapeutics買了一款PD-1/IL-2，后續(xù)未見(jiàn)新的進(jìn)展，似乎并未推進(jìn)到臨床階段。

目前免疫細(xì)胞靶向IL-2這個(gè)領(lǐng)域走的最快的非信達(dá)生物的IBI363莫屬，算是這個(gè)賽道的明星分子，至少開(kāi)展了400例以上樣本量的晚期癌癥患者的臨床試驗(yàn)。IBI363的結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理與羅氏的RG6279不同，如下圖所示。二者最大的區(qū)別在于IL-2部分，RG6279選擇的not-α IL-2，IBI363則選擇了α偏向的IL-2，確切的說(shuō)是一款較野生型IL-2的α受體親和力降低10倍，β受體親和力降低600倍的分子。

信達(dá)生物2023年在Nature cancer雜志上發(fā)表了其觀點(diǎn)，認(rèn)為保留IL-2Rα活性的野生型IL-2和IL-2Rβγ弱化的（IL-2α偏向）激動(dòng)劑，能夠有效擴(kuò)增腫瘤特異性CD8+ T細(xì)胞（TSTs），并且比不保留CD25活性的“not-α”IL-2具有更好的抗腫瘤效果和安全性。腫瘤特異性CD8+ T細(xì)胞共表達(dá)高水平的α受體和PD-1，更容易被保留α受體活性的IL-2激動(dòng)劑激活。IL-2活性的大幅降低有利于患者耐受IBI363更高的劑量，至少超過(guò)PD-1抗體的受體飽和劑量。而腫瘤中TSTs細(xì)胞高表達(dá)的α受體，又可以讓IBI363的IL-2部分在腫瘤微環(huán)境中恢復(fù)高活性。不過(guò)，α偏向的IL-2會(huì)引起外周血Treg明顯上調(diào)，有人將其解讀為Treg的上升可以降低外周的免疫毒性，增加耐受，并不影響腫瘤微環(huán)境藥效的發(fā)揮。2025年6月初，信達(dá)在ASCO會(huì)議上陸續(xù)更新了IBI363在結(jié)直腸癌、非小細(xì)胞肺癌和惡性黑色素瘤的數(shù)據(jù)，具體見(jiàn)下表。尤其是6月4日當(dāng)天，非小細(xì)胞肺癌的數(shù)據(jù)一經(jīng)披露，信達(dá)生物市值增長(zhǎng)了100多億港幣，整個(gè)ASCO期間，漲幅就更可觀了。從現(xiàn)有數(shù)據(jù)看，IBI363在2線及以上，且?guī)缀跞强筆D-1/PD-L1治療后的非小細(xì)胞肺癌患者，確實(shí)看到了較現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)治療更優(yōu)的生存期數(shù)據(jù)，尤其在3mg/kg高劑量給藥組，顯示出劑量相關(guān)性的藥效。當(dāng)然，IBI363的毒性也不小，非小細(xì)胞肺癌中，超過(guò)40%患者出現(xiàn)3級(jí)及以上AE，4名患者死亡，1名與治療相關(guān)。不過(guò)，信達(dá)生物認(rèn)為IBI363整體安全性可控。無(wú)論如何，IBI363為IL-2藥物的開(kāi)發(fā)注入了一針強(qiáng)心劑。

當(dāng)然，這里可以留下一些思考和討論，IBI363通過(guò)大幅度降低IL-2親和力，實(shí)現(xiàn)了PD-1有效劑量的遞送，并通過(guò)瘤內(nèi)α受體高豐度，保障了IL-2的瘤內(nèi)活性。Nidlegy這款I(lǐng)L-2/TNFα黑色素瘤瘤內(nèi)局部注射的成功也是類似道理。而早期失敗的IL-2，因毒性限制，均無(wú)法實(shí)現(xiàn)高分子數(shù)的體內(nèi)遞送，分布到瘤內(nèi)的分子就更為有限，也就談不上充分激活腫瘤特異性T細(xì)胞。如果有一款I(lǐng)L-2活性不錯(cuò)，且能夠?qū)崿F(xiàn)足夠劑量的瘤內(nèi)分布，與PD-1抗體聯(lián)用，是不是同樣可以達(dá)到IBI363的臨床效果？

無(wú)獨(dú)有偶，Regeneron也非常認(rèn)可IL-2Rα的參與對(duì)于系統(tǒng)性IL-2療法的抗腫瘤活性至關(guān)重要，并于2024年在Cell子刊上發(fā)表了相關(guān)設(shè)計(jì)和支持性數(shù)據(jù)。Regeneron這款分子名為REGN10597，與信達(dá)IBI363設(shè)計(jì)不同，采用的類似一種前藥設(shè)計(jì)，用IL-2Rα進(jìn)行了IL-2活性掩蔽，并形成跨掩蔽構(gòu)象。只有在表達(dá)IL-2Rα的細(xì)胞中才表現(xiàn)出高活性，而腫瘤抗原特異性的CD8+T細(xì)胞就屬于這種類型。

REGN10597目前處于臨床1期研究階段，尚無(wú)數(shù)據(jù)披露。

除了α偏向性設(shè)計(jì)，PD-1/IL-2領(lǐng)域也有not-α設(shè)計(jì)的分子。一款來(lái)自瑞士Anaveon的ANV600，一款則是來(lái)自中國(guó)科弈藥物的KY-0118，區(qū)別是前者的PD-1抗體是不阻斷型的，即不阻斷PD-1/PD-L1結(jié)果，僅發(fā)揮靶向富集IL-2的作用。

當(dāng)然，國(guó)內(nèi)也不乏深耕IL-2領(lǐng)域，進(jìn)行多路線布局的玩家。除了前文提到的非靶向IL-2產(chǎn)品LTC004，志道生物在免疫細(xì)胞靶向IL-2也進(jìn)行了專利布局，并已經(jīng)公開(kāi)，可見(jiàn)很早就開(kāi)始了這個(gè)方向的探索。厚積而薄發(fā)，志道生物是國(guó)內(nèi)在IL-2領(lǐng)域具備深厚底層技術(shù)積累的平臺(tái)。

除了依賴PD-1靶向免疫細(xì)胞，也可通過(guò)其它靶點(diǎn)實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞靶向的目的。比如，美國(guó)Asher biotherapeutics公司的AB248，是一款CD8抗體/IL-2融合蛋白，靶向CD8+T細(xì)胞。韓國(guó)GI innovation的GI-101、GI-102，則是通過(guò)IL-2與CD80蛋白融合，實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞靶向，并阻斷膜表面的CD80與CTLA-4的相互作用。目前這些分子均在早期臨床階段。

最后

從上世紀(jì)90年代第一代IL-2上市，距今已經(jīng)30多年。這期間，not-alpha IL-2的第二代主流設(shè)計(jì)曾經(jīng)為我們帶來(lái)了驚喜，并一度受全球大型制藥公司青睞，重金納入懷中。可IL-2的生物學(xué)機(jī)制過(guò)于復(fù)雜，似乎也注定了這個(gè)領(lǐng)域的起起伏伏。其實(shí)，大部分IL-2類產(chǎn)品可以使外周免疫細(xì)胞激活或增殖，但最終無(wú)法轉(zhuǎn)化為對(duì)腫瘤的抑制，或者抑制程度尚不夠。不過(guò)，倒也不必悲觀，反復(fù)試錯(cuò)和失敗，反而讓IL-2領(lǐng)域的研發(fā)逐漸演化到一種量變到質(zhì)變的狀態(tài)。無(wú)論是非靶向的LTC004、DF6215，還是腫瘤細(xì)胞靶向的CUE-101，或者腫瘤微環(huán)境靶向的Nidlegy及一些前藥，亦或是免疫細(xì)胞靶向的IBI363、REGN10597，如此豐富的策略和設(shè)計(jì)，都在不斷推動(dòng)著新一代IL-2滾滾向前。另外，還有來(lái)自“友商”（IL-15）的一些提示，IL-15超級(jí)激動(dòng)劑N-803與PD-1抗體聯(lián)用在PD-1抗體治療失敗的NSCLC中看到了明顯的OS優(yōu)勢(shì)。其實(shí)，IBI363和N-803在NSCLC中均同時(shí)證明了一件事，IL-2相關(guān)通路的激活潛在可以逆轉(zhuǎn)抗PD-1/PD-L1藥物的耐藥，尤其在延長(zhǎng)患者OS方面，已現(xiàn)端倪，有希望成為抗PD-1/PD-L1藥物的新搭檔。

IL-2這條賽道已經(jīng)積累了足夠多的經(jīng)驗(yàn)和數(shù)據(jù)，歷盡千帆之后，相信離突破也不遠(yuǎn)了。正所謂：千帆過(guò)盡浪淘沙，漫漫長(zhǎng)路起落斜。風(fēng)雨如磐摧壯志，霜雪滿徑礪心華。沉浮未改凌云志，砥礪方知?dú)q月賒。待到云開(kāi)見(jiàn)日月，扶搖直上九天霞。