都調控抗原遞呈，誰才是王者？又有誰在裸泳？

在疾病確定的情況下，選表型、定基因是課題展開的基礎。靶基因的獲取是研究的開始。除了做二代測序和單細胞多組學測序外，CRISPR文庫篩選是更常用的策略。而且，與其他篩選手段相比，文庫篩選體系性價比更高、特異性更高、與表型關系更確切。自從2012年體外編輯以來，文庫篩選已經發表不少頂刊論文。

MHC-I類分子參與腫瘤抗原遞呈，是抗腫瘤免疫的關鍵。在腫瘤免疫領域，PCSK9調控MHC-I類分子的研究備受關注，而且在臨床上有降血脂、抗腫瘤的雙重作用，是極有前景的靶點。

2023年8月，紐約大學格羅斯曼醫學院王俊教授、Iannis Aifantis教授在Cell期刊發表題為A membrane-associated MHC-I inhibitory axis for cancer immune evasion的論文。為了系統地研究調控MHC-I類分子的關鍵基因，研究人員使用特定的MHC-I抗原肽展開CRISPR-Cas9篩選。

急性髓系白血病 (AML)細胞起源于可以分化為抗原遞呈細胞的髓系細胞，在這些細胞系上發現的抗原遞呈機制很有可能存在于其他腫瘤類型。在篩選過程中，研究人員發現排名靠前的負調節因子包括表面蛋白sushi domain containing 6 (SUSD6)，跨膜蛋白127 (TMEM127)，以及E3泛素連接酶WWP2。其中，TMEM127為四次跨膜蛋白，與神經內分泌腫瘤易感相關，也被認為是一種Nedd4家族E3連接酶適配器，在沙門氏菌效應蛋白SteD存在下降解MHC II。SUSD6為單次跨膜蛋白，其免疫相關功能未見報道。

研究發現，在SUSD6缺失時，細胞膜表面MHC-I的表達會增強，促進急性髓系白血病（AML)和實體瘤中 T 細胞介導的抗腫瘤免疫。在小鼠AML模型中，SUSD6缺失顯著延緩了白血病腫瘤的生長，延長了小鼠生存期，而且這種抗腫瘤活性主要依賴于CD8+ T 細胞。而且，在多種實體腫瘤細胞系中，SUSD6敲除顯示出類似的結果。

生信數據挖掘發現，SUSD6在多種腫瘤中高表達，并且其表達程度與患者生存率負相關。SUSD6表達還與腫瘤微環境的 T 細胞激活特征負相關，提示SUSD6是一個具有臨床價值的新型免疫調節分子，其中用到GEPIA做差異分析！

機制研究發現，SUSD6敲除不影響MHC-I的轉錄和翻譯，但MHC-I蛋白表達顯著上調。因此，作者猜測SUSD6參與調節MHC-I降解。實驗證明，SUSD6促進細胞表面MHC-I進入溶酶體降解，但不影響MHC-I的胞內貯存和再循環。

SUSD6和TMEM127兩個膜分子可以同時與MHC-I直接相互作用，并招募E3泛素連接酶WWP2，從而形成一個四元復合物。WWP2在SUSD6和TMEM127存在的情況下介導了MHC-I泛素化以及溶酶體降解，從而降低MHC-I在細胞表面表達。

另外，通過敲除四元復合物中另一個重要分子，TMEM127，發現得到的表型與敲除SUSD6類似，從而揭示了靶向四元復合物分子進行抗腫瘤免疫治療的可能性。需要注意，雖熱SUSD6和TMEM127可與MHC-I類分子直接相互作用，但是并不參與MHC-I類分子降解。因此，只有在SUSD6、TMEM127和WWP2均表達的情況下，MHC-I類分子才會發生降解，上述三種分子在腫瘤中的表達具有普遍性嗎？這是個問題！

因此，比較而言，個人認為PCSK9的臨床應用價值更大。但是，這篇文章的篩選策略和流程是值得我們學習和借鑒的。見賢思齊，取其長處，把這篇文獻推薦給大家！