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俯視一洼碧綠的池塘——這抹綠意來自于其中繁衍興盛的藻類家族。其中的葉綠體,植物細胞的「光動力裝置」,在默默地生產代謝之外,也吸引到了合成生物學的注意力。
葉綠體合成生物學有望通過改善質體的功能來推進光合作用生物。然而,由于遺傳工具的稀缺和植物系統的低吞吐量,葉綠體工程工作面臨局限性。
德國馬克斯·普朗克陸地微生物研究所(Max Planck Institute for Terrestrial Microbiology)的研究者們正嘗試讓這個想象變為現實。他們開發了一套一套模塊化高通量葉綠體工程平臺, 能像拼裝積木一樣構建、測試上百種葉綠體基因組合,在短時間內篩選出高性能的「綠色系統」。
該研究以「A modular high-throughput approach for advancing synthetic biology in the chloroplast of Chlamydomonas」為題,于 2025 年 11 月 3 日發布在《Nature Plants》。
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論文鏈接:https://www.nature.com/articles/s41477-025-02126-2
來改造葉綠體試試
葉綠體(chloroplast)是植物細胞的能量中心,也是碳固定和光合作用的核心場所。然而,它有一個科學家頭疼已久的問題:難以被系統性地工程化。
不同于細菌或酵母,葉綠體擁有自己獨立的基因組和轉錄系統。這意味著,倘若要在葉綠體內導入外源基因,就會帶來各種復雜低效甚至無用的的實驗結果。
為了系統地表征數千個轉葉綠體 C. reinhardtii 菌株中的遺傳元件,該研究所的團隊開發了一種自動化工作流程,專門用于葉綠體基因組的模塊化和合成工程。通過自動化裝配和篩選流程,他們一次性構建并測試了超過 140 種調控元件組合,包括啟動子(promoter)、非翻譯區(UTR)、連接序列和報告基因模塊。
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圖 1:生成和高通量表征轉葉綠體 Chlamydomonas reinhardtii 菌株的工作流程。
在三周內,通過在平板上同時篩選每種構建體的 16 個重復菌落,可以輕松將 80%的轉化子驅動到同質葉綠體狀態,僅觀察到輕微的損失(總計約 2% 的損失)。使用此工作流程,挑取和劃線所需的時間減少了約八倍(從每周 16 小時處理 384 個菌株減少到每周 2 小時),而年維護成本減少了兩倍。
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圖 2:建立葉綠體工程的基本工具。
團隊所提供的庫有超過 300 個組件,所有組件都符合常見的生物技術標準,因此該 DNA 庫可以在其他實驗室中輕松使用。
合成光呼吸通路
既然現在可以穩定地將多個基因組合到葉綠體中,并且預測其活性,團隊將一個合成代謝途徑引入了微藻的葉綠體中,作為他們的概念驗證。
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圖 3:設計和測試合成葉綠體啟動子及葉綠體轉化庫。
在克隆轉化后,團隊從 10000 個菌落中選擇了 1536 個作為例子,進行第二次篩選,最終獲得 768 個測試例。雖然在三次重復熒光技術檢測后,90% 的菌株微弱或無光,但也有 10% 顯示了廣泛的 mScarlet 熒光信號。在這其中,通過抽樣,越有 82% 包含一個獨特的序列,剩下的則表現出序列混合。
接下來,工程化的代謝途徑使微藻在脅迫條件下更有效地吸收 CO?,結果生物量產量幾乎翻了一番——「渦輪增壓微藻」。這表明對葉綠體代謝的靶向干預可以提高生產力。
這些發現不僅為葉綠體提供了超過 20 個額外的合成啟動子序列,還證明了葉綠體中文庫轉化的強大力量,為葉綠體合成生物學和工程開辟了新的可能性。
未來的可編程作物
新的數據庫為廣泛的研究奠定了堅實的基礎,例如提高植物對熱、干旱或強光的抵抗力、改善營養成分或增加產量。它還可以作為新型碳固定途徑或高價值天然化合物生產的平臺。
這一平臺并不僅限于藻類,由于構建模塊基于標準化 DNA 語法和兼容接口,它可以與植物葉綠體轉化系統直接對接。這意味著未來科學家能在幾周內完成對成千上萬種基因組合的測試,然后選擇最優模塊用于作物改良。這種高通量策略在全球氣候變暖、糧食壓力增大的當下,或許會成為下一場農業革命的引爆點。
https://phys.org/news/2025-11-automated-chloroplast-screening-platform-crop.html
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