Phytomed: 成中醫大及其附屬醫院等揭示大建中湯中藥成分通過AMPK/PPARα/CPT1信號改善非酒精性脂肪肝機制

【寫在前面】：本期推薦的是由成都中醫藥大學現代中藥產業學院/藥學院西南中藥資源國家重點實驗室、成都中醫藥大學附屬醫院等研究團隊合作近期發表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示大建中湯中藥成分通過AMPK/PPARα/CPT1信號通路改善非酒精性脂肪肝。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Constituents-composed Chinese medicine of Dajianzhong Decoction ameliorates Non-alcoholic fatty liver disease via AMPK/PPARα/CPT1 signaling

背景

非酒精性脂肪肝（NAFLD）因其已成為最常見的慢性肝病之一而引起了越來越多的關注。大建中湯（DJZ）是一種具有抗NAFLD作用的經典中藥方劑；然而，其潛在的組成和分子機制仍然未知。

方法

為了通過成分組合中藥策略（cc-CM）探索DJZ抗NAFLD作用的潛在成分和分子機制，將高脂飲食（HFD）誘導的小鼠和游離脂肪酸（FFA）誘導的AML12細胞用作NAFLD的動物和細胞模型。中藥成分DJZ（DJZ-cm）是在其成分被血液吸收的基礎上制備的。進行RNA序列分析結合qRT-PCR驗證，分析DJZ cm的潛在靶基因。隨后進行生物信息學富集分析，預測潛在的分子途徑。最后，進行了蛋白質印跡、免疫組織化學、免疫熒光、組織病理學檢查和生化指標測定，以驗證預測的分子通路。

結果

DJZ改善了HFD喂養小鼠的NAFLD癥狀，包括肝脂肪變性、肝功能指數、口服葡萄糖耐量和胰島素耐量。此外，我們首次根據這些化合物在血清中的含量比例制備了DJZ cm，包括人參皂苷Rg1（30.5%）、人參皂苷Re（9.52%）、人參皂甙Rb2（10.5%）、參皂苷Rb1（15.1%）、羥基-α-桑椹糖（11.45%）、羥基-β-桑葚糖（5.11%）、香草內酯（8.77%）和6-姜酚（9%）。有趣的是，DJZ cm（40 mg/kg）的抗NAFLD作用與DJZ（400 mg/kg）相當。RNA測序結合qRT-PCR分析表明，AMPK/PPARα/CPT1信號傳導可能與DJZ cm的抗NAFLD作用有關。這些結果進一步驗證了預測結果，DJZ cm治療通過促進PPARα的核轉移和增加AMPK的磷酸化來上調CPT1A表達。最后，我們的結果表明，DJZ-cm可以通過多種藥物靶點發揮抗NAFLD作用，包括TRPV1和AMPK。

結論

cc-CM的使用是鑒定中藥活性物質和機制的可行方法，DJZ和DJZ-CM通過調節AMPK/PPARα/CPT1信號傳導和靶向TRPV1和AMPK對NAFLD具有可靠的治療作用。我們目前的工作將對DJZ臨床治療NAFLD的進一步現代制劑開發具有雙重意義。

圖文摘要

【前言】

非酒精性脂肪肝?。∟AFLD），也稱為代謝功能障礙相關脂肪肝病（MAFLD）或代謝功能障礙相關的脂肪變性肝病（MASLD），因其已成為臨床上最常見的慢性肝病之一，嚴重危害人類健康而受到越來越多的關注。NAFLD是一種與脂質代謝功能障礙和胰島素抵抗相關的復雜多系統疾病，可大致分為非酒精性脂肪肝（NAFL）及其晚期非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。此外，NAFLD是肝纖維化、肝硬化甚至肝細胞癌發展的重要致病因素。重要的是，非酒精性脂肪肝目前影響著全球高達38%的成年人口的健康；然而，不幸的是，臨床上缺乏可用于治療這種疾病的特定藥物。迄今為止，只有兩種臨床藥物（Rezafra和Semagutide）獲得了美國食品藥品監督管理局的批準；然而，上述兩種藥物的價格非常高，大多數家庭負擔不起。因此，尋找更新穎、可靠和安全的替代療法來改善NAFLD已成為當務之急。

中藥及其配方無疑有利于治療各種代謝性疾病，如NAFLD、糖尿病和肥胖癥，并可作為這些疾病的替代療法。此外，還有人認為，與合成藥物相比，包括中藥在內的天然藥物往往表現出更高的安全性。此外，毫無疑問，與合成藥物相比，中藥的價格通常較低。因此，包括中藥在內的天然藥物是尋找有效、安全、價格低廉的候選藥物的理想資源。大建中湯DJZ，是一種經典的中藥方劑，起源于漢代的《金匱要略》。DJZ具有“溫補虛、理氣止痛”的作用，可用于治療胃痛、腸易激綜合征、術后腸梗阻等。此外，據報道，DJZ可用于治療功能性消化不良、結腸炎和認知衰老。然而，到目前為止，DJZ的潛在成分和潛在的分子機制仍然未知。組分中藥（cc-CM）是一種從整體角度探索中藥方劑潛在活性成分和藥理機制的新概念和策略，這將是提高中藥方劑生物活性、質量穩定性和安全性的可行途徑。因此，在本研究中，我們首次在其成分被吸收到血液中的基礎上制備了中藥復方DJZ（DJZ-cm），并進一步探討了其抗NAFLD的作用和潛在機制，這將為DJZ臨床治療NAFLD的進一步現代制劑開發提供雙方面的參考。

【結果部分】

1.高脂飲食誘導的肥胖小鼠肝臟中 DJZ 對脂質代謝的影響。

2.DJZ 對AML-12細胞中FFA誘導脂質積累的影響。

3.大建中湯（DJZ -cm）中藥配方的成分制備。

4.DJZ 或 DJZ -cm對 HFD 小鼠肥胖和胰島素敏感性的影響。

5.DJZ 或 DJZ -cm對小鼠血清、組織及AML12細胞脂質代謝的影響。

6.RNA序列分析和富集分析。

7.DJZ 或 DJZ -cm對糖尿病（Diabetes Mellitus，HFD）小鼠肝臟組織中 AMPK / PPARα /CPT1信號通路的影響。

8.DJZ 或 DJZ -cm對FFA誘導的AML-12細胞中 AMPK / PPARα /CPT1信號通路的影響。

9.AMPK 抑制劑多索莫芬（化合物C）通過抑制 AMPK / PPARα /CPT1信號通路，對 DJZ -cm的抗 NAFLD 作用產生影響。

10.TRPV1抑制劑SB-366791通過 PPARα /CPT1A信號通路對 DJZ -cm抗 NAFLD 作用的影響。

11.HAS與姜酮分別結合TRPV1和 AMPK ，從而調控脂質代謝。

12.非酒精性脂肪肝采用 DJZ -cm療法的作用機制。

【結論與討論】

綜上所述，本研究結果表明，成分組合中藥（cc-CM）策略是識別中藥活性成分及分子作用機制的有效方法，同時為中藥現代化制藥提供了可行路徑。此外， DJZ 或 DJZ -CM通過靶向TRPV1和 AMPK 調控 AMPK / PPARα /CPT1信號通路，對 NAFLD 展現出可靠的治療效果，可作為治療該疾病的替代療法（圖12）。

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