近日,東南大學附屬中大醫院醫學檢驗科主任吳國球教授團隊,在國際生物傳感領域權威期刊《Biosensors & Bioelectronics》(中科院一區Top期刊)發表了題為“Extended strand-mediated target unmasking synergized with lyophilized hairpin probes for one-step viral RNA detection”(延伸鏈介導的靶標解蔽協同凍干發夾探針用于一步法病毒RNA檢測)的創新性研究成果。該研究為病毒感染的即時檢測(POCT)提供了全新的解決方案。
東南大學附屬中大醫院醫學檢驗科吳國球教授為通訊作者,東南大學醫學院檢驗系博士研究生王繼瑋與中大醫院醫學檢驗科楊傳坤主管技師為共同第一作者。
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病毒性傳染病的精準防控高度依賴于病原體核酸的高靈敏檢測。然而,傳統的分子診斷技術(如PCR)在應用于基層診所、家庭或個人健康管理等即時檢測場景時,往往面臨嚴峻挑戰,如操作復雜、專業設備依賴、試劑需要低溫冷鏈儲運、檢測耗時長,以及對臨床樣本中復雜結構的病毒RNA檢測靈敏度不足等。該研究以甲型流感病毒為檢測模型,提出了一種將“凍干預封裝技術(FABIL)”與 “延伸鏈介導的物理解蔽”相結合的協同策略。
該研究設計了一種雙鏈置換物理解封閉機制,通過兩條延伸鏈競爭性結合目標序列兩側的保守區域,物理暴露被隱藏的靶點,從而提升檢測效率,巧妙解決了靶標隱藏難題。同時,通過五步凍干工藝(預折疊-錨定-封閉-封裝-凍干,FABIL)解決核酸探針的常溫保存難題。該技術利用氧化石墨烯的吸附作用固定探針,抑制超過90%的背景信號,結合低熔點瓊脂糖實現原位封裝,最終形成多孔的固體基質。該基質可制成凍干微球或直接集成于檢測試紙條上,實現了探針在室溫下的長期穩定儲存,擺脫了對冷鏈的依賴。
基于上述核心技術,團隊開發了兩種形式的檢測系統(FABIL-M-LFIA 和 FABIL-I-LFIA),均展現出卓越的檢測性能。
該項研究成果不僅為病毒感染的即時檢測提供了新工具,更在家庭健康管理、基層醫療單位、重大疫情防控等場景展現出巨大的應用潛力。其“設備無依賴、冷鏈無需求、操作極簡便”的特點,有望推動分子診斷技術走進尋常百姓家,為提升公共衛生應急能力和全民健康水平貢獻重要力量。(通訊員趙峰峰 編輯崔玉艷 校對劉敏 編審程守勤)
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